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of 中国实验血液学杂志JournalExperimentalHematology2011增刊 ·121· 进行体外培养，设立含有3．5¨M氟达拉滨的实验组及 照组相比，经氟达拉滨刺激48h的实验组CLL细胞中 不含氟达拉滨的对照组，经过48h的培养后收集细胞。 iodide 流式细胞术检钡1]Annexinv—FITc／propidium (PI)以明确凋亡程度；SYBRGreen荧光染料法的实达水平未见显著性差异；③4例存在p53基因异常I笋JCLL 细胞经氟达拉滨刺激后，胞浆中p21蛋白表达水平无明 时定量逆转录PCR(qRT-PCtL)方法检测Puma、 Noxa、Bim和Bcl-2表达水平；间期荧光原位杂交 显变化，3例存在ATM基因杂合性缺失的CLL细胞经氟 达拉滨刺激后，胞浆中p21蛋白表达明显升高；④对照 (FISH)技术检i贝I]ATM基因和p53基因缺失；PCR联 合DNA序列测定检测免疫球蛋白重链可变区(IgVH) 基因突变和p53基因突变；流式细胞术检i贝IJCLL细胞内 p53／p21蛋白水平以明确p53基因的功能状态。应用统 达拉滨刺激后，p53功能正常的CLL细胞凋亡率明显高 计软件SPSSl7．0对数据进行统计分析，实验组与对照 组CLL细胞间凋亡水平及基因表达水平的差异性用配 前者中的表达水平亦明显高于后者(P=0．0430)。经 对的Wilcoxon秩和检验，具有不同生物学特征的CLL氟达拉滨诱导后存在ATM基因杂合性缺失的CLL细胞 细胞间凋亡水平及基因表达水平的差异性分析采用 Mann-WhitneyU】|佥验，P0．05为差异有统计学意义。 结果：①CLL细胞被分离时凋亡率为7．41％(4． 胞经氟达拉滨诱导后凋亡水平和Puma表达水平有高于 11—10．71)，单纯使用培养液培养48h后自发性凋亡率 IgVH无突变的CLL细胞的趋势，可能因样本较少，差 为31．40％(18．14％44．66％)，凋亡水平较离体时明显 异不具有显著性。 增加(P=0．0002)；经含3．5“M氟达拉滨的培养液培结论：氟达拉滨诱导CLL细胞的凋亡有赖于具有 养48h后，CLL细胞的凋亡率为59．6％(43．72％一75． 正常功能的p53基因，p53缺失和／或p53突变均可导致 48％)，显著高于对照组自发性凋亡水平(P=0． 0019)；②与细胞分离时水平相比，经48h体外培养后 有正常的p53功能。氟达拉滨的抗肿瘤作用主要是通过 对照组CLL细胞中Puma表达水平明显增加(P=0． 诱导p53基因下游的关键靶基因Pum疠E达增强实现的， 0317)，但Noxa(P=O．5404)、Bim(P=0．3067)、 Bcl-2(P=0．1747)的表达水平均未见明显变化。与对导作用。 B137 254例急性髓系白血病患者多种分子突变的整体研究及其临床意义 乔纯张苏江 史文婷钱思轩缪扣荣 朱华渊 李建勇 南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院血液科南京210029 目的：本研究探讨急性髓系白血病(AML)患者 结果：254例初诊AML患者，其中男性139例，女 FLT3基因内部串联重复突变(fit3一itd)、核仁磷酸蛋 者为20例(20／171，11．7％)，主要见于M3、M2和M4 白(npml)基因突变、CCAAT／增强子结合蛋白a (cebpa)、c一妇、IDHl、IDH2和Dnmt．3a突变情况及 临床特征。