松杉灵芝发酵菌丝体中水溶多糖的分离纯化与结构的比较研究.pdfVIP

维普资讯 2ff一 三f {f蝴 7 真 菌 报 13(3)：21--‘21，t99‘ ^c M ycololica Sfn 松杉灵芝发酵菌丝体中水溶多糖的分离纯化 与结构的比较研究 墨盟 苗春艳 -． — —_———一 ●———————一 V (求北师范大学生物系，长春l知O2● 琢爹0 擅要 松杉灵芝发酵菌丝体经热水提取，冻融分级及乙醇二次分级，分离纯化出 GFb级份， 龟涞及凝玟柱层析示其为均一多糖，分子量为9．8万。小于子实体多糖相应投份。 GFb经红外光谱 ，气相色谱，气质联机 ，碳 I3桉敲共振，高碘酸盐氧化 ，Smith降解，甲 基化及部分酸承解分析 ，确定萁基本结构中主链为 l 6葡萄塘基和 l 6半乳糖基构成，二者 之比为 l：1，分交点在 0-5位上 分技点率为 0钐，与子实体多糖 GF，相同，侧链 由 l一3葡萄 糖基 ，1÷●葡萄糖基 ，末端葡萄糖基及末端半乳糖基构成，分子中分枝率为55．6％，较子实体 多糖 G 卦拽率咯低，分技链暗短。 菌丝体多糖。 ，乡罐， 实体 中水溶多糖进行了研究 ，现对液体发酵松杉 灵芝菌丝体中水溶多糖进行研究，国内外尚未见报道。 1 材料与方法 ， 1·I 材科 松杉灵芝毒酵菌丝体 (菌种分离 自长 白山野生松杉灵芝 Genodermatswfa~~wrr)及其粗多塘均 由长春中医学院中药系提供。 I．2 慑叠与方法 1．2．I 粗多螭提取及蒜融分级按我们前文…所连同法进行。 l·2．2 ． 己醇二次分投：冻融后的上清液直接用95％乙醇分级沉淀，自 l：o．5至 I：3．0(v，v)，其中1： 2·o为主蔓级份，谈级份经 SephsroseGL一B‘柱屡析为单一宽峰，此级份再制戚 2％水溶液，以9％乙 醇同法进行再次分投，其中 1：2·o(v，v)仍为主要级份，柱层析为单一窄峰，经 Pronase酶法及 Sefag 怯联合腾蛋白质，得脱蛋白多糖 GFb。 I·2·3 纯度鉴定：玻璃纤维纸 电涞及琼脂糖凝腔 SepharoseCL一4B柱层析，按我们前文 ，同法进行 1·2．● 分子量测定：以壤胶柱屠析法按我们前文 l所述同法进行。 I·2·5 结构分析：Pe，Gc，lR， 【“憎 测定，107氧化，Smith降解，甲基他及其产物分析均接我们前 文 “_。所述方法进行 ，GC—MS用 HP一5988AGC／MS机以 25米HP—OVIO1弹性石英毛细管柱 测 定， 并接谈机所附数据库检索定性oGC 以 p-E9t0气相色谱仪同柱进行掼I定，“C-NMR以 AC—eo桉磁 共振倪按我们前文 同法进行。部分酸永解按我们前文 “所述同法进行。 国家 自拣科学基金资助项目 t993—02一l9|￡辘 维普资讯 真 菌 学 报 2 结果与讨论 2．1 粗多麓氧麻期詹量 粗多糖得率为 17％，高于子实体务糖 酚一硫酸法测其总多糖含量为7O％，凯氏法测 得蛋 白质含量为 27．5移，经 Pc，GC分析测定其组成为 Rha：Gal：Glc：XylAra一 1．0： 7．5：18．0：0．5：0．8，粗多糖中成糖比例 比子实体粗多糖高 ，且增加了 Ara成份。 2．2 多麓 的分离纯化