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KRAS基因突变检测试剂盒.doc
K-RAS基因突变检测试剂盒
【简 介】
K-Ras是公认的癌基因,参与表皮生长因子受体(EGFR)信号传导过程,与EGFR抑制剂类靶向药物的疗效密切相关。《美国国立癌症综合网络(NCCN)结直肠癌临床实践指南》(2008年第3版)明确指出:一是所有转移性结直肠癌患者都应检测K-Ras基因状态;二是只有K-Ras野生型患者才建议接受EGFR抑制剂如西妥昔单抗(Cetuximab)和帕尼单抗(panitumumab)的治疗。09年NCCN非小细胞肺癌临床实践指南》明确指出:当K-Ras基因如果发生了突变,则不建议病人使用特罗凯(Tarceva/厄洛替尼/Erlotinib)进行分子靶向治疗。
【检测原理】
本试剂盒采用新型突变研究技术——高分辨率熔点曲线分析(High Resolution Melting Analysis,HRM),应用配有HRM模块的荧光定量PCR仪器(如LightCylcerTM480等)分析,即可完成对样品基因型的判断。
?
【仪器要求】
Roche LightCyclerTM 480、Qiagen Rotor-Gene 6000、ABI 7500 FAST和ABI 7900HT Fast、Idaho LightScanncer、Rotor-Gene Q 等仪器。
【新应用】
本试剂盒除用于实体组织外,国内外首次实现非侵入性的血清或血浆游离DNA中K-ras突变检测,可以作为不能手术病人的替代选择或手术后复发病人的筛选。另外,实时动态监测血液中K-ras突变,可反应肿瘤变化情况,客观预测和评价病人对各种治疗药物的反应,及时调整治疗方案。
【技术特点】
? 高通量:1次可检测10-300个样本,国内首次实现高通量检测。
??高敏度:HRM检测灵敏度能达到1%-0.1%,是传统“PCR+测序”方法的25-250倍。
??特异性好:PCR产物无需后续处理,特异性达100%;
??重复性好:实验闭管进行,避免交叉污染。
??精确度高:精确获得K-RAS基因多个位点状况,包括已知的7个热点突变(第12编码子核苷酸突变,第13编码子核苷酸突变和第61编码子核苷酸突变),也可同时侦测未知突变。
??适用范围广:本公司K-RAS基因突变检测试剂盒可用于新鲜或酒精固定、石蜡包埋的手术标本,也可用于微量的穿刺或活检标本、血液标本、粪便标本等非手术标本的检测。而传统“PCR+测序”方法对大部分不能手术的患者难以检测。
【产品规格】
产品名称 规格 WZ-KS12 K-RAS基因突变检测试剂盒(HRM) 12人份 WZ-KS24 K-RAS基因突变检测试剂盒(HRM) 24人份 WZ-KS48 K-RAS基因突变检测试剂盒(HRM) 48人份 ?
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?
【参考文献】
? Whitehall V, Tran K, Umapathy A, et al. A multicenter blinded study to evaluate KRAS mutation esting methodologies in the clinical setting. J Mol Diagn. 2009;11(6):543-52.
◆? Zou H, Taylor WR, Harrington JJ, et al. High detection rates of colorectal neoplasia by stool DNA testing with a novel digital melt curve assay. Gastroenterology. 2009;136(2):459-70.
◆? Kramer D, Thunnissen FB, Gallegos-Ruiz MI, Smit EF, Postmus PE, Meijer CJ, Snijders PJ, Heideman DA. A fast, sensitive and accurate high resolution melting (HRM) technology-based assay to screen for common K-ras mutations. Cell Oncol. 2009;31(3):161-7
◆? Simi L, Pratesi N, Vignoli M, Sestini R, Cianchi F, Valanzano R, Nobili S, Mini E, Pazzagli M, Orlando C. High-resolution melting analysis for rapid detection of KRAS, BRAF, and PIK3CA gene mutationsin colorectal cancer.
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