白蔹抗肿瘤活性部位筛选与研究.pdfVIP

白蔹抗肿瘤活性部位的筛选研究 张梦美，叶晓川*，黄必胜，刘焱文 （湖北中医药大学中药资源与中药化学省级重点实验室，武汉，430061 ） [摘要] 目的 分离筛选出白蔹抗肿瘤的活性部位，并初步探讨其作用机制。 方 法 采用溶剂法和硅胶柱层析法对白蔹醇提物进行不同部位分离，运用四甲基偶 氮唑盐（MTT ）法对各部位进行体外抗肿瘤活性测定，Hochest/PI 双染色法观察 白蔹活性提取物抑制细胞增殖的作用。结果 在25 ～200mg ·L-1 范围内，乙醚 和乙酸乙酯部位及从乙酸乙酯部位分离得到的P2、P3 对人肝癌HepG2 细胞的增 殖有较强的抑制作用, 且具有明显的浓度依赖性。结论 乙醚和乙酸乙酯部位是 白蔹抗肿瘤的活性部位，并能够引起HepG2 细胞凋亡。 [关键词] 白蔹；抗肿瘤活性；MTT ；HepG2 细胞；细胞凋亡 Abstract：OBJECTIVE To separate and select anti-tumor activity site of Ampelopsis japonica Mak, and explore its machine processed. METHODS The anti-tumor activity of the different extracts and fractions was determined by MTT assay. The effects of active site on the apoptosis of HepG2 cells were studied by Hochest/PI staining. RESULTS Ranged between 25 ～ 200 mg ·L-1,all of the ethylether and acetate position, fractions P2 and P3,strongly inhibited cell proliferation of HepG2,and the suppression ratio was raised with increasing concentrations of drug.CONCLUSION The ethylether and acetate position are the anti-tumor extracts from Ampelopsis japonica Mak.And they can induce apoptosis of HepG2 cell. Keywords：Ampelopsis japonica ; anti-tumor activity; MTT; HepG2 cell; apoptosis 作者简介：张梦美，女，硕士研究生 研究方向：中药药效物质基础 * 通讯作者: 叶晓川, 女, 博士, 研究员 研究方向: 中药药效物质基础及中药新药开发研究 Tel: （027 Email ：yxxcc1965@163.com 中药白蔹为葡萄科蛇葡萄属植物白蔹（Ampelopsis japonica （Thumb. ） Makino ）的干燥块根，始载于《神农本草经》。其味苦、辛，微寒，具有清热解 毒、消痈散结、敛疮生肌等功效，用于治疗痈疽发背，疔疮，瘰疬，烧烫伤等症。 [1-5] 现代药理研究表明该药具有抗菌、免疫调节、抑制毛发生长及抗肿瘤等作用 。 有关白蔹的临床应用及药理活性研究多集中在于抗菌作用方面，而其具有的抗肿 瘤活性目前已逐步引起大家的关注，临床上常将其与其他中药配伍用于乳腺癌、 鼻咽癌等多种癌症的治疗具有较好的疗效[6] 。本研究考察了白蔹提取物各部位对 人肝癌细胞株HepG2细胞抑制作用的影响，筛选出抗肿瘤的活性部位并初步探讨 其可能的作用机制，为进一步研制开发新型抗肿瘤新药提供科学依据， 1 材料和仪器 1.1 药物 干燥白蔹，用70%乙醇加热回流提取3次，分别是2小时，1小时，1小时，提 取液减压浓缩，回收溶剂，得到醇提物浸膏，称重。将浸膏悬浮于水中，根据极 性依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别得到以上四个部位及水溶 液层共五个部分，将各溶剂挥干，