基因c-myc在细毛羊毛囊发育过程中表达与研究.pdfVIP

其他动物的健康养殖与疫病防控蟋》 727 T060042 基因c．myc在细毛羊毛囊发育过程中的表达研究 余娟娟1赵金山2刘开东2刘鲁梅1柳楠1 (1．青岛农业大学动物科技学院，山东青岛266109；2．青岛市畜牧兽医研究所，山东青岛266100) 引言／目的 敖汉细毛羊作为我国主要的毛用绵羊品种，研究其毛囊的分化和发育成熟，一方面可以从细胞水平 探究其控制毛囊发育和分化的分子机制，为细毛羊的良种优化和鉴定提供理论基础；另一方面也可以为 敖汉细毛羊常规育种、扩繁及羊毛生产实践提供指导，从而创造更大的社会经济价值。我们知道细毛羊 毛囊在胚胎期发育时期以及出生后的生长成熟过程中经历着独特而又高度有序的细胞水平的分化程序， 而该过程中的信号级联以及可能的基因互作调控网络并不是十分清楚，其中包括存在调节上皮成分和间 质成分相互作用的大量信号转导通路，以及就其自身毛囊发育过程中也有着特定信号通路和特异基因参 与表达调控，本研究通过基因芯片探针结合实时定量PCR技术，建立了敖汉细毛羊毛囊发育不同时期的 viral 信号通路和特异基因网络调控模型，揭示了基因c．myc(v．mycmyelocytomatosisoncogenehomolog) 参与wnt信号通路调控的毛囊发育过程。这对于调控细毛羊毛囊发育有着重要意义。 材料方法 采集和分离敖汉细毛羊颈部和腹部不同发育时期的皮肤上皮组织样，利用高量RNA提取试剂盒， 分别提取不同样品总RNA并利用核酸蛋白分析仪进行纯度和浓度分析。之后一部分RNA样本做基因芯 片表达谱分析；另一部分RNA样本用于下一步实时定量PCR进行特异基因的定量检测。 结果 本研究分析了基因C．myc的基因序列和蛋白序列信息，并基于NCBI数据库分析了c．myc蛋白在不同 物种的同源性，绵羊基因c．myc翻译编码长度为439氨基的蛋白质片段，绵羊C．myc蛋白与其在人类、小 鼠、兔和牛的同源性都高达93．25％，与Kiermer等研究结果基本一致，这说明其蛋白序列在不同物种中 非常保守，基因C．myc的表达对于维持不同物种的个体毛囊发育和成熟的重要性。本研究基因芯片分析 结果和定量PCR检测发现，在毛囊发育的不同时期(既羊毛发育的休止期和生长期)的基因c．myc有着 差异表达，而且这种差异表达结果显示C．myc有着独立于wnt信号通路之外的调控基因互作网络。 讨论 c-myc是调控毛囊干细胞分化和羊毛新陈代谢更替的重要因子，传统的研究表明c．myc只是作为wnt 信号通路激活后的一个下效作用基因，而本研究发现C．myc不但介导参与wnt信号通路调控的敖汉细毛羊 毛囊发育分化，而且在细毛羊毛囊发育过程还有着独立和未知的基因调控网络。前人的研究发现在表皮 干细胞向短暂扩充细胞转化的过程中，c．myc基因表达存在明显差异，其含义说明基因c．myc可能与表皮 干细胞分化存在某种内在关系。c．myc蛋白对基因转录的调控是多层次、多因子、有一定时空次序的复 杂精细调控，目前对它们在毛囊分化发育过程中的作用研究仍停留在初级阶段，它们与哪些因子协同作 用?还不是很清楚。综合前人的研究发现c．myc不是特异只位于writ信号通路下游，那么又是通过何种信 号途径实现细胞间对话的?进而实现调控毛囊发育过程中的众多基因转录和表达的?这些问题仍有待 于进一步研究。