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IPTG诱导浓度_时间及温度对重组促性腺激素释放激素基因表达的影响.pdf
2006 8 17
IPTG
1, 2 3 4 5 2 2
金元昌 , 刘 利 , 苏晓艳 , 李景鹏, 李会东, 周建红
( 1. , 530004; 2. , 411201;
3. , 542800; 4. , 411201;
5. , 150030)
: Q786 : A : 1004 7034 ( 2006) 08 0017 03
: 促性腺激素释放激素; 诱导浓度; 外源蛋白; 达
: 以人工合成的促性腺激素释放激素( gonadotrop n re leas ng hormone, GnRH ) /转运肽( TRS )基
因与 达载体 pGEX - 6p - 1相连的重组子( pGE - G )作为研究对象, 转化大肠杆菌BL2 1( ED3) plyS
利用 IPTG作为诱导剂, 分析比较不同 IPTG 诱导条件对于 达产物的影响, 以确定最佳 IPTG 诱导条
件结果 明: 融合蛋白大部分以包涵体的形式存在, 诱导温度为 30 e ; IPTG 浓度为 012 mmo l/L
时, 可溶性融合蛋白 GST - GnRH /TR S 达量最大光密度扫描对 达产物进行初步定量, 明
达产物约占菌体总蛋白的 3313%
IPTG B- D - , B- ; ,
, , IPTG
, 1. 3
, , ( , B eckm an ),
O , ( , M ett ler To ledo) , ( , G lson, ,
( GnRH ) , Eppendorf) , - 20 e ( ) , - 70 e ( ,
GnRH , Sanyo) , ( , B o - Rad) , (
, , , Sanyo), ( , UV P ) , (
[ 1]
GnRH , M ll pore), ( DYY - ,
IPTG ), ( F rom a Sc ent f c 18291 SN 1 17069
GnRH , IPTG - 15) , ( , UV - 120 - 02) , pH
GnRH ( pH S - 3C , ),
1 ( DK - 80 , ) ,
1. 1 (TGL - 16, ),
pGEX - 6p - 1, ( LD4 - 2 , ) ,
; JM 109 BL 21( DE3) p lyS, ( H ZS- D , ) ,
PROM EQA ; / ( DYY - , )
pGE - G, 1. 4
pGE - G BL21( DE3) p lysS
1. 2
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