LCMSMS串联质谱仪应用于中药多组分成分同时定性和定量分析.pdfVIP

LC-MS/ MS串联质谱仪应用于中药多组分成分同时定性和定量分析 背景 中药成分繁多，含量低，在发挥其疗效时又往往需要通过多组分的协同行动。因此，建立中药多组分测定 方法将有助于阐明中药整体作用，并达到全面控制中药质量的目的。 冬凌草为唇形科香茶菜属植物，研究表明其对多种移植性肿瘤有抗肿瘤作 用，并有抗菌、消炎等作用。冬凌草中含有多个种类的化合物，其中在抗肿 瘤、抗微生物、消炎以及抗氧化中起主要作用的组分是二萜类化合物，酚酸类 化合物以及黄酮类化合物三种。由于冬凌草成分复杂，部分活性组分含量低， 而主要活性组分二萜类化合物UV吸收较弱，用传统的HPLC-UV法测定非常困 难，采用串联质谱法测定虽然能够大大提高灵敏度，但由于同系列化合物之 间在色谱，质谱行为上非常相似，仅仅通过MRM法往往难以区分。本文通过 QTRAP®质谱仪的独有的采集方法，对东陵草中主要有效成分进行定量的同时， [1] 进行了进一步的定性和确证 。 解决方案 AB SCIEX公司的QTRAP® LC-MS/ MS系列质谱仪创新性的将三重四极杆质谱和线性离子阱结合起来，集 中二者定量和定性方面强大的功能，在中药多组分定性和定量测定中得到广泛的应用。利用QTRAP® 质谱仪的 的方法，在 正、负检测模式下同时进行串联质谱 定量工作和离子阱质谱 定性工作以 MRM-IDA-EPI ESI MRM EPI 达到对冬凌草多组分同时进行定性和定量测定。 实验与结果 1. 仪器和方法 该试验在 ® ，液相为安捷伦 完成。 AB SCIEX 3200QTRAP LC-MS/ MS 1200 MRM-IDA-EPI模式首先通过MRM方法检测不同的组分，当MRM信号强度到达设定的阈值之后自动触发 出线性离子阱的增强型子离子扫描模式，得到高质量的MS/ MS质谱图，进行定性工作。 中药多组分定量和定性分析 2. 实验结果 实验中测定了冬凌草中 种二萜类成分， 种酚酸类成分和 种黄酮类成分见表 ，得到的三类组分代表性 19 6 3 1 化学结构和色谱图如下图所示。 二萜类组分Sodoponin结构式及图谱 酚酸类组分Ferulic Acid结构式及图谱 黄酮类组分Isorhanmnetin结构式及图谱 表 冬凌草中 种活性组分部分方法学实验结果 1. 28 MS1 2 Linear range LOQ Intra-day Inter-day No. Compounds MS (m/z) (m/z) (µg/ mL) (ng) RSD% RSD% 1 Effusanin A 349.3* 331.3*, 313.3, 301.3 0.0137-0.4 12 0.112 3.90 2.52 2 Enmein 363.3* 327.3, 281.2*, 253.3 0.0543-1.63 0.109 1.62 1.76 3 Lasiod