PCR_双酶切鉴定STGC3抑癌基因重组子假阳性研究.pdf

一 双酶切鉴定 抑癌基 因重组子假阳性研究 蒋俊 豪 贺修胜 南华大学肿瘤研究所 湖 南 衡 阳 摘要 目的 探讨 与双酶切技术联合使用 鉴定 阳性重组子 的特异性和可 靠性 , 评价长期保存 的重组质拉再 次测序 的必要性 。 方法 对随机选取 已经过测序验证 的三组 、 一 组 重组子 首先经过 氛千平皿 培养挑单克 隆筛选 , 然后 单独或联合使用 和双 限制性 内切酶 和 酶切方 法鉴定 , 将 阳性样 品送 交生 物 工程公 司测 , 比 并评价两 结 果 的一 致性 。 结果 三组 重组子 经 一 双酶切检测 阳性而 不 能通过测 , 明 序 较 者 序 说 该 测 方 法 用 确 阳 , 同 明 长 必 次 。 的 污 、 室 检 在运 中 实存在假 性 时证 重组载体在 期保存后 有 要再 鉴定 结论 保存过程 中 杂菌 染 实验 操作 中的质杜 交叉污 染 以及重 组载体基 因突变是基 因工程操作 中不 可 忽视的 问题 一 双酶切鉴定重组载体存在假 阳性 的问 , 计 应 阳性与 阴 污 染 照 , 的重 实 。 题 实验设 中 包含 性 对 并有足够 复 验 关链词 双酶切 基 因 假 阳性 中 图分 类 号 文 献 标 识 码 文 章 编 号 一 《