Vegfr2luc转基因子代小鼠的鉴定.pdf

中国肺癌杂志2011年5月第14卷第s期 ChinJLungCancer，May20i1Vo1．14No．5 DOI：10．3779j／．issn．1009—34192．011．05．02 ·基 础 研 Vegfr2一luc转基因子代小鼠的鉴定 王伟强 刘红雨 宋志涛 王玉丽 王竞 李颖 李永文 王岷 陈军 周清华 【摘要 】背景与 目的Vegfr2．1uc转基因小鼠体内血管内皮生长因子受体2(vascularendothelialgrowthfactorrecep— tor2，VEGFR2)的表达可以驱动荧光素酶报告基 因 (1uciferase,luc)的表达 ，是活体动物水平实时监测血管生成情况 的有利工具。本研究旨在对子代Vegfr2．1uc转基因小鼠进行鉴定，以确定能否用于血管生成研究。方法 vCR~N新 生小鼠基因组内f“c基因；利用活体成像技术观察新~LVegfr2．1uc转基因小鼠生长发育过程中以及皮肤伤 口修复过程中 基因表达水平的变化情况；荧光素酶报告基因检测试剂盒检测成年 (8N龄 )转基因小鼠各脏器荧光素酶的活性 和Rea1．timePcR检测各器官VEGFR2mRNA的表达水平。结果 Pc 占果显示50％(56／112)的新生小鼠携带jc“基因。 活体成像结果显示随着Vegfr2．1uc转基因小鼠发育成熟，1uc表达量逐渐降低 (PO．001)；在皮肤伤 口修复过程中， 伤 口处1uc表达水平先增强后降低 (P0．001)。雌性成年转基因小鼠各脏器VEGFR2mRNA的表达水平与荧光素酶活 性呈正相关 (r=0．948，P0．001)。将睾丸组织除外，雄性成年转基 因小 鼠各脏~W GFm mRNA的表达水平与荧光素 酶活性同样呈正相关 (r=0．836，P0．001)。结论 Vegfr2．1uc转基因子代小鼠体 内luc表达水平的变化可以反映VEGFR2 的表达情况。 【关键词 】动物模型；血管新生；荧光素酶报告基因 【中图分类号 】R734．2 IdentificationoftheOffspringofVe r2一lucTransgenicM ouse WeiqiangWANG，HongyuLIUJZhitaoSONG YuliWANG，JingWANG，YingLIYongwenLI，MinWAN GJ JunCHEN ，Q~nghuaZHOU Tianjin LaboratoryofLungCancerMetastasisandTumorMicroenviroment,LungCancerInstitute,TianjinMedicalUniversity GeneralHospital,Tianjin30005~China；2DepartmentofThoracicTumorCenter,GeneralHospitalo3TianjinMedicalUniversity, Tianjin3000S~China Correspondingauthor：Qj~ghuaZHOU,E—mail：zhouqh1016@yahoo．com．cn； ]unCHEN~E—mail：hunter#2004@yahoo．com A【bstract】BackgroundandobjectiveAtransgenicmouse，Vegfr2-luc，inwhichaluciferasereporter(1uc)isun- dercontrolofthemurineVEGFR2promoter,canbeusedtotrackangiogen