利用PiggyBac转座系统构建_省略_表达鹅RIG_I的DF_1细胞系_胡跃.pdf

中国动物传染病学报 2014,22(3): 53-60 Chinese Journal of Animal Infectious Diseases ·研究论文· 利用 PiggyBac 转座系统构建稳定表达 鹅 RIG-I 的 DF-1 细胞系 胡 跃 1 ，孙英杰2 ，王晓旭 3 ，仇旭升2 ，宋翠萍2 ，谭 磊2 ，胡桂学 1 ，丁 铲2 （1. 吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118 ；2. 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241 ；3. 安徽农业大学动物科技学院，合肥 223006 ） 摘 要：维甲酸诱导基因-I （retinoic acid inducible gene-I ，RIG-I ）是最近几年发现的一种细胞内模式识别受体，能够特异性的 识别并结合病毒RNA ，进而发挥抗病毒效应。RIG-I 在进化中相对保守，但已有报道和我们的前期研究显示：家禽中鸭和鹅体 内均有RIG-I 受体，但鸡却缺乏RIG-I 受体。为了研究这种天然缺失对鸡是否有不利影响，本研究利用PiggyBac 转座系统将鹅 源RIG-I 转染入鸡胚成纤维细胞系DF-1 ，两次亚克隆后获得单个克隆，以荧光、RT-PCR 及Western blot 进行鉴定，最终获得稳 定表达鹅RIG-I 的DF-1 细胞系，为进一步研究鸡的先天性免疫机制和鹅RIG-I 的功能打下基础。 关键词：鹅维甲酸诱导基因-I ；鸡胚成纤维细胞系DF-1 ；PiggyBac 转座系统 中图分类号：S852.42 文献标志码：A 文章编号：1674-6422 （2014 ）03-0053-08 CONSTRUCTION OF CHICKEN EMBRYO FIBROBLAST CELL LINE DF-1 STABLY EXPRESSING GOOSE RIG-I THROUGH PIGGYBAC TRANSPOSON SYSTEM 1 2 3 2 2 2 HU Yue , SUN Ying-jie , WANG Xiao-xu , QIU Xu-sheng , SONG Cui-ping , TAN-Lei , HU Gui-xue1, DING Chan2 (1. College of Animal Science and Technology, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China; 2. Shanghai Veterinary Research Institute, CAAS, Shanghai 200241, China; 3. College of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 223006, China) Abstract: Retinoic acid inducible gene-I (RIG-I) is a family member of cytoplasmic pattern recognition receptors (PRRs), which acts as a sensor for RNA virus and plays an important role in antiviral innate immunity. RIG-I is evolutionally conserved among most species. However, several reports and our previous studies have identifi ed that receptor