利用单根肌纤维法分离和培养猪骨骼肌卫星细胞及其成肌诱导分化.pdf

农业生物技术学报，2011年，第19卷，第5期，第856～863页 Journal 1，V01．19，No．5，856～863 ofAgriculturalBiotechnology，201 研究报告 ALetter 利用单根肌纤维法分离和培养猪骨骼肌卫星细胞及其成肌诱导分化 刘月光史新娥沈清武袁媛杨秋梅高晓娟陈宗正杨公社’ 西北农林科技大学动物科技学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100 +通讯作者，gsyan9999@hotmml．tom 摘要建立单根肌纤维法体外培养猪骨骼肌卫星细胞的体系，了解其增殖和成肌特性。通过I型胶原酶 消化，从猪骨骼肌中分离完整的单根肌纤维并培养，用细胞免疫荧光鉴定肌纤维上的卫星细胞，随后对从单 blot分析骨骼 根肌纤维上游离出来的卫星细胞进行细胞免疫荧光染色，传代培养，成肌诱导分化和Western 肌卫星细胞成肌特异性蛋白的表达。结果显示：分离并培养的单根肌纤维上附着有卵圆形的细胞，并随时间 box,P似7)和成肌 的推移，细胞缓慢向外迁移并增殖，卫星细胞特异性标志基因对盒转录因子(Pairedprotein Differentiation 分化抗原(Myogenic 分化后，细胞开始汇合，并呈方向性生长，最终形成多核肌管，且成肌特异性标志基因Myogenin和myosin heavy 该实验成功建立了猪骨骼肌单根肌纤维的体外培养方法并获得了高纯度的卫星细胞，为骨骼肌卫星细胞进 行活体移植治疗相关疾病研究提供了实验材料。 关键词骨骼肌纤维，卫星细胞，Pax7，猪 of MuscleSatelliteCells IsolationandCulturePorcineSkeletal bySingle Their Differentiation MuscleFiberand Muscle Yuan Chen Liu ShiXineShen Yuan Gao Zongzheng Yueguang Qingwu YangQiumei Xiaojuan YangGongshe’ ofAnimalFat andMuscle and 712100，China Laboratory Deposition Development，NorthwestAgriculturalForestryUniversity,Yangling ’Correspondingauthor,gsyan9099@hotmail．com 1 1．05．Ol DOI：10．3969／j．issn．1674-7968．201 meansofthe fiber AbstractThe establisheda satellitecellsi／7,vitromodel presentstudy porcine by single the whichisolated methodto the and