利血平致大鼠脾虚模型木糖排泄率与肠粘膜ATP含量的研究.pdf

利血平致大鼠脾虚模型木糖排泄率与肠粘膜ATP 含 量的研究1 ， ， 1 1 1 1 2 * 郭文峰 ，高小玲 ，李茹柳 ，陈蔚文 1 广州中医药大学脾胃研究所，广州（510405 ） 2 上海市高校中医内科学E-研究院，上海中医药大学，上海（201203 ） E-mail ：piwei@ 摘 要：[ 目的]观察利血平所致脾虚大鼠的病理改变情况，为在该模型上观察益气健脾 方药的作用提供参考。[方法]模型组以利血平注射造模 15d，停药后再观察 30d ，实验 周期共45d ；另设正常组观察45d 。观察大鼠一般状态、体重、尿D-木糖排泄率、小肠 粘膜 ATP 含量、胃肠粘膜病理组织学、脏器系数等指标。[结果]模型大鼠体重和尿 D- 木糖排泄率下降（与正常组比较P0.01 ），持续至45d ；小肠粘膜ATP 含量比正常组略 为降低；尿D-木糖排泄率改变与小肠粘膜ATP 含量改变呈正相关；胃肠粘膜病理组织 学检查未见明显改变；肝和胸腺脏器指数降低。[结论]利血平所致脾虚大鼠病变状态可 持续较长时间，与益气健脾方药缓慢起效的特点相符；有肠道消化吸收功能降低的改 变，并伴随肠粘膜 ATP 含量的降低。该动物模型可用于观察益气健脾方药改善消化吸 收功能等作用。 关键词：脾虚证；动物模型，病理改变 利血平致动物脾虚模型是脾虚实验研究的常用模型[1] 。尿D-木糖排泄率降低是脾虚 患者的临床表现之一，虚损程度越重，排泄率越低[2] 。脾虚失运则营养物质吸收功能低 下，同时可能与能量代谢异常有关。本实验在利血平致脾虚大鼠模型上，观察大鼠一 般状态、胃肠病理组织学、脏器系数、尿D-木糖排泄率、小肠粘膜ATP （三磷酸腺苷） 含量等改变，为在该模型上观察益气健脾方药的作用提供参考。 1 实验材料 1.1 动物 SD大鼠，雄性，广州中医药大学动物中心提供，SPF级，体重220～240g ，许可证号： SCXK(粤)2003-0001 ，粤鉴证字2006A041 。 1.2 试剂 利血平注射液：广东邦民制药有限公司出品，批号050614 ；0.9%氯化钠注射液（生 理盐水）：西南药业股份有限公司出品，批；D-木糖：上海伯奥生物科技有限 公司出品，批号050107 ；对溴苯胺：中国医药（集团）上海化学试剂公司出品，批号 ；硫脲：广州化学试剂厂出品，批2 ；ATP试剂盒：美国Promega 公司出品，Cat ：FF2000 ，Lot# ：224431 。冰乙酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、中性甲醛、 无水乙醇、二甲苯、丙酮等试剂均为分析纯。 试剂配制：对溴苯胺溶液：对溴苯胺2g溶于100mL以硫脲饱和过的冰乙酸上清液， 当天配用，避光保存；Tris-HCl ：0.02mol/L ，以1%HCl调pH值为7.75 。 1本课题得到国家自然科学基金项目（编号）；广州中医药大学中医药科研创新基金课题（编 号05C007 ）；上海市教育委员会E-研究院建设计划项目（编号E03008 ）的资助。 - 1 - 1.3 仪器 UV-mini 1420 日本岛津紫外可见分光光度计。荧光照度计：Veritas9100-002型， Turner Biosystems Instrument Luminometer 出品。 2 实验方法 2.1 造模方法 [3] 参照文献 改进，预试验结果提示大鼠体重300g左右开始造模效果较好，故饲养大 鼠至300g±20g 随机分组。正常组：1d-15d皮下注射生理盐水，16d-45d改为灌胃蒸馏水； 模型组：