半抗原_载体蛋白偶联物的三种电泳鉴定方法.pdf

中国农业科学 2010,43(3):565-570 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.03.017 半抗原-载体蛋白偶联物的三种电泳鉴定方法 1 1，2 3 1 1 1 1 雷红涛 ，庞 杰 ，贺丽苹 ，杨金易 ，孙远明 , 秦毅兰 ，梁明标 1 2 （华南农业大学食品学院/广东省食品质量安全重点实验室，广州 510642 ； 福建农林大学食品科技学院，福州 350002 ； 3 华南农业大学分析测试中心，广州 510642 ） 摘要： 【目的】建立一种简单方便的半抗原-载体蛋白偶联物电泳鉴定方法。【方法】选用SDS、非变性 琼脂糖凝胶电泳、高效毛细管区带电泳3 种方法对载体蛋白、偶联剂变性的载体蛋白、半抗原-载体蛋白进行比较 鉴定，同时与光谱法结果比较。【结果】对分子量差异较小的载体蛋白和半抗原-载体蛋白偶联物，SDS不能 有效分辨；但偶联前后载体电荷有变化时，非变性琼脂糖凝胶电泳却能有效分辨游离的载体蛋白和半抗原-载体蛋 白偶联物，相对SDS表现出更高的分辨灵敏度；毛细管区带电泳能高效分辨载体和半抗原-载体蛋白偶联物， 结果直观，但需较贵重的专用仪器。琼脂糖电泳和毛细管电泳法与可见-紫外光谱法鉴定结果一致。【结论】3 种 电泳方法各有优缺点，非变性凝胶电泳简便、廉价、有效，较适合普通实验室使用。 关键词：半抗原-载体蛋白偶联物；SDS；非变性琼脂糖凝胶电泳；毛细管区带电泳 Identification of Hapten-Carrier Protein Conjugate by Three Electrophoresis Methods 1 1,2 3 1 1 1 1 LEI Hong-tao , PANG Jie , HE Li-ping , YANG Jin-yi , SUN Yuan-ming , QIN Yi-lan , LIANG Ming-biao 1 （Guangdong Key Laboratory of Food Quality and Safety/College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642; 2College of Food Science and Technology, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002; 3Instrumental Analysis and Research Center of South China Agricultural University, Guangzhou 510642 ） Abstract: 【Objective 】To establish a simple electrophoresis characterization method for hapten-carrier protein bioconjugate. 【Method 】 SDS, nondenaturing agarose gel electrophoresis and high performa