单侧输尿管梗阻大鼠α平滑肌蛋白和E钙黏蛋白表达与肾小管上皮细胞转分化.pdfVIP

中国药物与临床 2012 年 3 月第 12 卷第 3 期 Chinese Remedies Clinics ，March 2012,Vol.12,No.3 ·321 · 单侧输尿管梗阻大鼠 α鄄平滑肌蛋白和 Ｅ鄄钙黏蛋白 表达与肾小管上皮细胞转分化 纪艳萍 肾小球硬化和肾小管间质纤维化是各种原因引起的肾 管间间质增宽或间质纤维化，评价 肾小管间质纤维化程度 。 ［］ 脏疾病进展为终末期肾功能衰竭的共同途径 １ ，而肾小管间 1.4 ＵＵＯ 大鼠肾组织 α－平滑肌蛋白、Ｅ－钙黏蛋白表达的免 质纤维化在其中的意义尤为重要。 近年来研究提示肾小管上 疫组织化学染色 ：采用链酶亲和素－生物素－过氧化物酶复合 皮细胞转分化是致肾纤维化的重要机制之一。 本研究采用免 体（ ）法： 的石蜡切片 ，脱蜡 ，梯度酒精水化， 过 SABC ５ μｍ ３％ 疫组织化学方法探讨单侧输尿管梗阻（ ）幼年大鼠慢性 氧化氢灭活内源性过氧化物 酶 ， 微波修复抗 原 ＵＵＯ １５ ｍｉｎ １０ 肾小管间质纤维化形成的不同时期，肾小管上皮细胞转分化 ，磷酸盐缓冲液 （ ）洗 次；正常山羊血清 ｍｉｎ ＰＢＳ ５ ｍｉｎ×３ ３７ ℃ 的相关分子 钙黏蛋白与 平滑肌蛋白的蛋白表达趋势及 封闭 ，分别滴加不同稀释度 的一抗 （钙黏蛋白 ， Ｅ鄄 α鄄 ３０ ｍｉｎ Ｅ鄄 １∶１５０ 给予干预治疗的效应。 一抗均为 Ｂｏｓｔｅｒ 公司提供）； 二抗为生物素化山羊抗兔 ＩｇＧ 1 材料与方法 工作液，３７ ℃孵育 ３０ ｍｉｎ ； 滴加 ＳＡＢＣ，３７ ℃孵育 ３０ ｍｉｎ，闭 实验动物分组及模型建立： 周龄雄性 幼年大 光条件下二氨基联苯胺 （ ）显色 ，苏木素复染 ，氨水 １．1 ３~４ Ｗｉｓｔａｒ ＤＡＢ ３０ s 鼠 ７２ 只， 体质量 ８０～１００ g ， 山西医科大学实验动物中心提 返蓝，中性树脂封片 。 供。 正常饮食，适应性饲养 ３ d 后随机分为 3 组：正常对照组 1.5 免疫组织化学结果半定量分析 ：参照 Ｈｕｇｏ 法半定量肾 （假手术组） 只， 模型未治疗组 只； 模型干预 小管间质免疫组织化学染色结果 ， 倍光镜 下 目测切 片 ２４ ＵＵＯ ２４ ＵＵＯ ２００ 治疗组 ２４ 只， 于手术后第 ２ 天给予苯那普利及氯沙坦各 ６