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产黄青霉的杂交育种.pdf
遗传 IIERED[TAS 1(6)-. 26--29 1979
产黄青霉 的杂交育种
陶 静 之
华(北制药厂,石家庄)
选育高产菌株是工业微生物提高产量最有 2.基本培养基 (Mti1) 葡萄塘4%,
效的方法。我们于1974-1977年,对产黄青霉 NaNO30.3务,KH2Po40.2%。MgS04.7H2O
(Penicilliumclirysogenusn)采用杂交育种和诱变 0.05%,KCl0.05%,FeSO10.001%,琼脂2.5%,
育种相结合的方法,选得了一株高产菌株杂 PH7.0,
3-25-103,从1977年开始用于生产。该菌株在 3.种子培养基 玉米浆 (100并干物)
20吨和58吨罐试验共229批,与同期对照菌 4外,葡萄塘,多,尿素0.1并,NH,N0;0.2 ,
利相“比,青霉素发酵单位平均提高8%。青霉素 KH,P040.1并。CCOa3 0.5 ,玉米油。.12%,
滤液产量比1976年同期提高6.45多。 PH 自然。
4.发酵培养基
材 料 和 方 法 (1)花生粉 4.5%,乳糖 11%,葡萄塘
一()原始亲本 1.5并,Na2SO40.1多,KH,PO,0.1并,NI-I,NO,
P69-8菌株抱子呈土黄色,生长能力强,发 0.2并,Na2S2030.8多,CaC030.8%,尿素0.1,
酵过程工艺容易控制,产量稳定,但发酵单位水 苯乙酸胺 (PAM)0.25务,苯乙酸 (1AA)0.38并,
平不高。73-8-2为非生产菌株,抱子呈淡黄 玉米油1异,PH7.0,
色,生长较慢而弱,发酵单位高,但生化代谢有 (2)花生粉3外,玉米蛋白粉1多,葡萄糖
特定要求,在发酵过程中发酵液稀,工艺不容易 1.5多, NH,NO,0.125多, Na2SO40.025多,
控制,产量波动大,故不利于作为生产菌株。因 Na2S2030.3并,KH2PO40.05多,尿素0.1%,
此,选择产黄青霉73-8-2和生产菌株P69-8作 CaC030.5%,PAM0.07%,玉米油1%,pH7.0o
为杂交的原始亲本,以期获得高产菌株。 中间补料成份:花生粉0.6%,Na2S20,
(二)培养基 0.54汤,CaCO,0.15 ,PAM0.45 ,葡萄糖
1.完全培养基 C(MS 6.5多。
(1)甘油1.5多,葡萄糖1.5外,玉米浆 5(0务 三()诱变剂及剂量
干物)0.25多,蛋白陈0.6多,NaCl0.5多,KC1 紫外线 U(V)(30W) 30cm,27分钟,
0.05另,KH2P040.03外,MgS04.7H200.005务, Y射线俨Co) 3-10万伦琴,高能电子印射
CUS04·5H2O0.002外,FeSO,7H,00.0015外, 线)0.03-0.08兆拉得,N一甲基-N-亚硝基-
MnS04-7H200.00002%0,琼脂2.,外,pH7.0o N,一硝基呱(NTG) 1mg/ml,30-60分钟,乙
(2)乳糖1.5并,葡萄糖0.5多,玉米浆 烯亚胺 (EI) 1:1000-1:2000,亚硝基甲基脉
(50并干物)0.25关,蛋白陈0.5并,NaCl0.4并, (NMU) 1-2mg/ml,氮芥 N(-m) 500`/ml,
M9SO4·7H2O0.05%,KH2P040.06 ,FeC13 60分钟,硫酸二甲脂 D(MS) 1-2/万。
6H200.0005并,CuS04.5H200.0002并,琼脂 (四)标记菌株的诱发和分离
2.5界,PH 自然。 采用过滤浓缩全分离法:原始亲株经诱变
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