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2015-08-26 发布于重庆
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第卷第期西安交通大学学报 (医学版 ) 24 5 Vol.24No.5 年月 ( ) 2003 10 JournalofXianJiaoton Universit MedicalSciences Oct.2003 g y 人基因外显子的实验研究 ECK 3 孔令洪,李瑶琛,王一理,司履生 (西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,陕西西安 ) 710061 摘要:目的建立人基因外显子 ( )的克隆与鉴定方法,研究其在细胞系中的突变情况。方法 eck 3 exon-3 ZR-75-1 设计一对基因特异性引物,提取人正常皮肤组织和乳腺癌细胞系基因组 ,并以此作为模板, eck exon-3 ZR-75-1 DNA 采用聚合酶链反应( )技术扩增基因片段,克隆入中介载体中构建重组质粒,转化大 PCR eck exon-3 UCm-T JM109 p 肠杆菌,扩增后经酶切、初步鉴定后,进行序列分析。结果从正常皮肤组织上皮细胞、细胞系基因组 PCR ① ZR-75-1 中,经扩增,获得了人基因片段; 建立了正常皮肤组织、细胞系基因片段 DNA PCR eck exon-3 ② ZR-75-1 eck exon-3 的克隆; 细胞系中基因片段存在突变。结论从人组织与细胞系基因组中,成功地构建 ③ZR-75-1 eck exon-3 DNA 了人类基因的克隆,并证实基因在乳腺癌细胞系中有突变,为进一步研究基因 eck exon-3 eck exon-3 ZR-75-1 eck 在肿瘤形成中的作用奠定了基础。 exon-3 关键词: ( )基因;基因克隆;聚合酶链反应; 蛋白; 细胞系