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人工染色体载体的研究和应用.pdf

中国现代医药杂志 年 月第 卷第 期 · · 2008 10 10 10 MMJC, Oct 2008, Vol 10, No.10 120 ·综 述 · 人工染色体载体的研究和应用 潘春留 吴红梅 刘长青 卿素珠 关伟军 马月辉 基因工程技术的迅速发展, 使人类对生物体基因的结 克隆系统较好地解决了 YAC 文库面临的问题,BAC 文库 构、功能、表达及其调控的研究深入到分子水平。 而对特定基 (bacterial artificial chromosome ,BAC) , 即细菌人工染色体文 因片段的分离和获得,则是上述研究的基础。 完整的基因组 库。该载体容量虽然较 载体系统小 一般可达到 , YACs , 350kb 文库的构建,使任何DNA 片段的筛选和获得均成为可能。 因 却具有许多YACs 所不可比拟的优点,如BAC 具有嵌合和重 此,基因组文库是进行分子克隆和基因组结构与功能研究的 排率低、外源DNA 能稳定遗传、转化效率高、重组 DNA 容易 [1] 基础。 早在 年代人们就已提出基因组文库的概念 , 分离、可采用高效的电转化体系等。 在同时期发展起来的还 70 1978 年 等设计了哺乳动物基因组的大量随机片段方案 有噬菌体 衍生的人工染色体载体系统 Maniatis P1 P1 s (PI -derived [2] 。 自1973 年Cohen[3]构建了第一个质粒载体pS101 以来,越 artificial chromosome , PACs) [6] , 能容纳的外源DNA 片段较 来越多的克隆载体相继涌现,使得克隆载体的整体结构和克 小 只有 左右。 年, 等发展了一种新的人 , 100 kb 1995 Farr CJ 隆效率有了很大改善。 工染色体系统, 哺乳动物人工染色体 (mammalian artificial 所谓人工染色体,是指一类能在生物细胞中独立、稳定 chromosome ,MAC) ,最大能容纳 2000kp 的外源DNA ,可以携 存在和遗传的人工重组 分子 它至少应具备三种功能元 带足够长的包括编码顺序和可以有效调控治疗基因表达的 DNA , 件的类似组份: 复制原点 、 着丝点 片段 是体细胞基因治疗的有力工具。 人类人工染色体

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