LC2010AHT型高效液相色谱仪标准操作规程.docVIP

标 题 文件编码 SOP/QA-2012 版 次 第版 起 草 人 起草日期 执行日期 审 核 人 审核日期 颁发部门 批 准 人 批准日期 复制份数 共份 分发部门 目的：为检验人员提供LC-2010A HT型高效液相色谱仪标准的检验操作规程，保证工作质量。 范围：适用于LC-2010A HT型高效液相色谱仪的使用。 责任：质量保障管理中心检验员。 内容： 1.设备组成和工作条件 该仪器为集中一体化设计，主要由在线脱气机、自动进样器、柱温箱、紫外检测器及四元低压泵组成。 2.准备工作 2.1将色谱甲醇及流动相用0.45um滤膜过滤并脱气。 2.2对所进样品用0.45um滤膜过滤。 2.3检查色谱柱安装是否正确良好。 2.4检查泵、检测器、数据处理机的各个连接头连接是否正确良好。 3.开机 3.1启动稳压器电源 3.2电压稳定后，依次打开仪器电源及计算机。 4.泵、自动进样器和色谱柱的清洗 4.1打开“LCsolution”操作系统，点击“操作”项下“分析”标志，将仪器与计算机控制器连接。 4.2连接完成后，分析程序进入控制界面，同时，仪器显示进入系统控制面板。 4.3点击“F5”进入常规系统操作显示界面。在确认计算机控制器未启动仪器的情况下，打开泵头脱气阀，点击“purge”按钮，进入脱气清洗泵及自动进样器界面。依次点击“F1-F5”，对你所使用的泵及自动进样器进行脱气。脱气完成后，各个泵及进样器则会显示“fin”，否则则是“exe”状态。泵脱气完成后，会自动进入常规操作显示界面，此时表示脱气完成，可以将泵阀关闭，进行用前平衡色谱柱或是用前清洗。 4.4使用色谱柱前，用低流速纯有机相进行30min左右的清洗，清洗时，在分析界面的“简单设置”版面“模式”下拉菜单中，选择合适模式，如“低压梯度”或是“等浓度洗脱”。然后在“流速”一栏输入流速“0.3ml/min”，在“泵浓度”一栏输入“100”，表示所用有机相比例为100%，完成后点击“下载”方可使仪器正常运行。然后用流动相比例的有机相-水进行再次清洗30min（操作如上），然后可以更换流动相进行平衡色谱柱（更换流动相时，应注意流路中是否有气泡，若有，则需重复3.3的操作，待气泡完全排除后，方可继续）。 5.实验条件的设定 5.1用流动相平衡色谱柱时，可根据实际情况，将流速逐渐升至所需流速，通常所使用的流速为1.0ml/min、1.2ml/min、0.8ml/min。 5.2检测器波长及检测时间选择。在“简单设置”操作版面中，“检测器A”项下“波长通道1”一栏输入你所需的检测波长“X”，“结束时间”一栏输入你所需检测时间“X”，点击“下载”即可。 5.3柱温的选择。在“简单设置”操作版面中，“柱温”项下“温度”一栏输入你所需检测温度“X”，点击下载即可。 6.基线检查 待仪器运行参数设定完成后，平衡约30min左右后，查看基线是否为直线且稳定，若是，则可进样，否则，继续平衡。 7.试验方法确定 7.1将处理后的样品放入样品盘，记录相应的盘号及位置。 7.2点击“数据采集”项下“单次运行”按钮，在此介面输入相关信息，如“文件保存路径”，“样品信息”，“样品位置”等。输入完毕后，点击“确定”，进行方法确认。 7.3待此次运行结束时，点击“LCsolution”项下“再解析”按钮，打开在解析界面，找到前次运行记录的色谱图，进行数据处理。点击数据分析界面下“向导”按钮，进行积分参数设定，设定完成后，点击“下一步”进行数据峰的选择，再点击“下一步”，直至完成“向导”。然后双击此文件，保存当前设置后，点击“文件”项下“方法另存为”，进行方法保存。 8.样品批处理 8.1点击“实时分析”界面下“批处理”按钮，进入批处理界面。 8.2点击“向导”按钮，进入向导界面，根据提示进行向导操作。完成后，点击“批处理开始”按钮，进行批处理。 9.报告制作及图谱打印 9.1打开在解析版面，点击“报告”界面，进入报告编辑界面。点击“文件”项下“打开报告文件”选择已有模板进行报告编辑。 9.2报告编辑完成后，点击快捷栏中“打印”即可打印报告。 10.清洗及关机 10.1实验完成后，用相应的有机相-水组成清洗流动相，将色谱柱及仪器管路进行清洗。一般使用10%甲醇水（或10%乙腈水）冲洗30min后，换比例至100%甲醇（或乙腈）继续清洗30min后，降低流速至0ml/min后，退出“LC-solution”“实时分析”系统，断开仪器连接。 10.2关闭电脑，关闭仪器开关，关闭插板电源。 10.3对使用情况进行登记。 11.维护保养 11.1液相色谱使用的流动相，应使用分析纯或色谱纯，且用前需进行过滤脱气处理。 11.2样品进样前，需进行过滤，否则会使柱头堵塞，柱压升高，污染流通