一株嗜酸氧化亚铁硫杆菌的筛选及生长条件研究.pdfVIP

亿 学与 生 物 Z程 2010，VOI．27No．11 Chemistry Bioengineering 一 株嗜酸氧化亚铁硫杆菌的筛选及生长条件研究 吕早生，袁向利 ，李凌凌 (武汉科技大学化学工程与技术学院，湖北 武汉430081) 摘 要 ：从湖北某矿 的酸性矿坑水 中取样 ，在 9K培养基 中分离得到一株细茵 cl，对该茵株进行 了形态、生理生化特 性及 16SrRNA序列分析 。结果显示该茵为革兰 氏阴性茵 。短杆状 ，经 16SrRNA鉴定为嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidi~ thiobacillusferrooxidans)；生理生化鉴定结果表 明其可以利用单质硫和亚铁生长 ，不能利用硫代硫酸钠生长。以Fe 的氧化率为指标 ，研究了初始pH值、温度 、接种量对 C1茵生长 的影响。结果表 明，其最适初始 pH值为 2．0、温度为 3O℃、接种量为 1O 。考察了不同浸矿方法对C1茵浸磷率的影响，结果显示，经过 24d的生物浸出，普通浸矿法的浸磷 率达到 58．87 ，比批浸矿法高 出9．6 。 关键词 ：嗜酸氧化亚铁硫杆菌；9K培养基 ；16SrRNA鉴定；浸磷率 中豳分类号：Q935 TF18 文献标识码：A 文章编粤：I672—5425(2010)11—0051—04 嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillusferroox— 基 中，在 3O℃、150r ·min 条件下进行富集 ，经过 3 idans，简称 At·f菌)为好氧化能 自养微生物 ，以空气 ～ 4次传代培养 ，使嗜酸氧化亚铁硫杆菌成为优势菌 中的C0 为碳源 ，靠氧化基质 中的Fe 为 Fe。和无 群 ，取培养至对数期时新鲜菌液涂布于 9K 固体培养 机硫为硫酸根而获得 能量。这一特性使其在细菌冶 基上，在 30℃培养箱中分离培养，待长出菌落后，挑取 金、酸性废水处理、烟气脱硫和煤炭脱硫等领域具有潜 不同菌落重复在液体培养基 中扩大培养并在 固体平板 在的应用价值[1]。At·f菌可利用黄铁矿等矿物中的 中反复分离，如此进行 3～4次 ，直到显微镜观察得到 S、Fe，从而使矿粉分解 ，释放 出包裹在其 中的贵重金 一 株菌体形态单一的纯培养菌株，命名为 C1。用光学 属 ，因此受到人们 的普遍重视。已知硫杆菌对磷矿 的 显微镜观察细菌形态及革兰 氏染色情况 。 浸出有一定的效果 ，但浸出率偏低口]。作者分离出了 1．3．2 16SrRNA鉴定 一 株氧化亚铁硫杆菌 C1，对其生长条件进行 了探索 ，经 通过对菌株的 16SrRNA序列分析进行菌株 的鉴 初步浸矿实验发现，该菌可以有效脱去矿石中的磷 。 定。PCR反应参考文献[6]。PCR产物的纯化使用北 京道普生物技术有限公司试剂盒，测序 由六和华大基 1 实验 因科技股份有限公司完成 。 1．1 菌种、培养基 1．3．3 生理生化代谢特征鉴定 菌种取 自湖北某矿酸性矿坑水。 能源利用特性 ：在 9K基础培养基 中分别加入蛋 9K液体培养基 和 9K固体培养基 。 白胨、葡萄糖、蔗糖、丙三醇(终浓度均为 0．1 )，单质 1．2 矿粉 硫 、硫代硫酸钠 (终浓度均为 1 )，七水合硫酸亚铁 实验用矿石均来 自西部矿业 (湖北宜昌)，经破碎、 (4．47 )十蛋 白胨 (O．1 )，七水合硫酸亚铁 (4．47 ) 磨细后作为实验用样 。磷矿石 中P根据 P。O 的品位 +葡萄糖 (O．1 )，其 中硫代硫酸钠 、七水合硫酸亚铁 计算为 22．8％，属于 中低 品位磷矿。对该磷矿进行 用过滤法除菌