RP—HPLC法测定大鼠血浆中红景天苷的浓度.pdfVIP

JIANGXIJOURNAL OFTR4DITIONALCHINESEMEDICINE RP—HPLC法测定大鼠血浆中红景天苷的浓度 -k 刘建明 熊立新 余松华 (1．江西医学院上饶分院 上饶 334000) 摘要 ：目的：建立RP—HPLC法测定大鼠血浆中红景天苷的含量。方法：健康雄性 sD大鼠灌 胃红景天苷脂质体(50ing／kg)后， 于相应时间点眼眶静脉丛取血0．3mL，乙酸 乙酯萃取法分离得到样品分析，采用DiamonsilC，色谱柱 (5p,m，4．6mnl×150 mm)，流动相：水／甲醇=80／20(v／v)，流速 1mL／分钟，紫外检测波长为275nm，柱温30oC，内标为茶碱。结果：红景天苷线性 范围为 1．5—30 g／mL(R=0．9957)，最低定量限为1．5 g／mL，平均回收率为86．96±2．06。结论：建立的RP—HPLC测定法 简便、快捷、准确，能满足红景天苷的血药浓度测定及药动学研究。 关键词 ：红景天苷 ；血浆 ；高效液相色谱法 一 中图分类号：R285．5 文献标识码：B 红景天苷 (salidroside)是 中药红景天(Rhodiola 1 材料 roseaL．)中的重要有效成分。研究表明：具有耐缺 1．1 药品与试剂 氧、抗衰老、降血脂、降血糖、增强免疫功能等作用， 红景天苷标准品(中国生物制品检定所，批号： 目前主要用于治疗糖尿病 、肺心病、风湿、类风湿及 110818-20040)，内标为茶碱 (theocin)(中国生物制 冠心病、高血压等心血管疾病 ’2j。目前对红景天 品检定所，批号：060806)，红景天苷脂质体 (为江西 苷的药物代谢动力学研究较少，并且存在不少问题。 中医学院药学院提供)，甲醇 (色谱纯，南京化学试 如：沉淀法处理发现杂质较多，血浆处理复杂等问 剂一厂)，乙酸乙酯 (山东禹王实业有限公司)，纯净 题。笔者在试验 中通过多次实践 ，采用 RP—HPLC， 水，其余试剂均为分析纯。 以茶碱为内标物测定大 鼠血浆 中红景天苷的浓度。 1．2 仪 器 该方法专属性强、准确 、快捷方便等特点。 高效液相色谱仪(LC一10AD)及紫外检测器 接进样 ，但由于样 品中杂质干扰过大，丹酚酸 B峰 ：1：62、28：10：1：61进行测定 ，考察丹酚酸 B的峰形 与相邻吸收峰不能达到基线分离。故采取酸化萃取 及分离情况 。结果表明，流动相为甲醇．乙腈．甲酸． 法对样品进行纯化 ，分别尝试用 乙酸乙酯和正丁醇 水(28：10：1：61)时，丹酚酸B与相邻吸收峰可达到 萃取对样品进行纯化处理。经过比较试验，乙酸乙 基线分离，但拖尾现象并未改善。故考虑增大甲酸 酯萃取的转移率高于正丁醇，故选择乙酸乙酯萃取， 比例进行改善，结果流动相为 甲醇．乙腈一2％甲酸水 蒸干后以75％甲醇溶解 ，作为供试品溶液。 溶液(28：10：62)时，拖尾现象消失。 3．2 流动相的选择 参考文献 本研究曾参照 《中国药典)2010年版一部丹参 [1]杜冠华，张均 田．丹参水溶性有效成分——丹酚酸研究进展 [J]．基础医学与临床 ，2000，20(5)：lO—l4． 项下的色谱条件 ，以甲醇一乙腈一甲酸．水 (30：10：1： [2]国家药典委员会 ．中国药典2010年版(一部)[S]．北京：化学工 59)为流动相进行测定 ，结果主峰与相邻吸收峰不 业出版社，2010：70—71， 能达到基线分离，且存在拖尾现象。故将流动相 比 (收稿 日期 ：2010-09-04 责任编辑 ：曾文雪) 例分别调整为24：8：1：67、26：8：1：65、9：1：6