艾迪注射液诱导Bel-7402人肝癌细胞分化的研究.pdfVIP

J1ANGXIJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE 艾迪注射液诱导Bel一7402人肝癌细胞分化的研究 ★ 彭安 陈敏珍 徐仿周 申东兰 (北京大学深圳医院 深圳518036) 摘要：目的：探讨艾迪注射液诱导BelI7402人肝癌细胞分化作用，为肝癌的分化治疗提供可借鉴的资料。方法：选用反映肝细 胞恶变的甲胎蛋白(AFP)的分泌量、r一谷氨酰转肽酶 (r．GT)和醛缩酶 (ALD)，反映肝癌细胞分化的酶学指标酪氨酸一仅-酮戊二 酸转氨酶(TAT)，鸟氨酸氨基甲酰转移酶 (OCT)和碱性磷酸酶(ALP)作为观察肝癌细胞恶性表型逆转的指标。结果：Bel-7402 人肝癌细胞经4mg／ml艾迪注射液处理后，AFP分泌量明显低于对照组，r-GT和ALD活力也明显低于对照组；相反，OCT、rAT 和AIJP的活力则明显高于对照组，差异均具有显著性(P0．05)和(P0．01)。结论 ：证明艾迪注射液是体外培养 Bel-7402 人肝癌细胞有效的分化诱导剂。 关键词 ：艾迪注射液 ；肝癌细胞 ；细胞分化 中图分类号：R733．71 文献标识码：B 近年来研究证实，艾迪注射液能抑制、杀灭癌细 浓度作为实验的药物浓度。 胞，提高机体免疫力，促进癌细胞再分化及肿瘤细胞 接种2×10个细胞于40mL培养瓶中，实验组 凋亡 ¨J，是新型多靶点抗肿瘤药，但诱导人肝癌细 用艾迪注射液处理细胞，对照组只加培养液，各组设 胞分化还未见报道。本研究尝试着用我国传统的中 3个平行样品，每隔48小时换液，并取实验组和对 药抗癌药诱导人肝癌细胞分化，探讨艾迪注射液对 照组各3瓶，收集细胞培养液，经4000rpm离心5 Bel-7402人肝癌细胞的分化诱导作用，为原发性肝 分钟，取上清测AFP分泌量，而将收集的细胞置于 癌的分化诱导治疗提供实验依据。报告如下： pH7．4、0．05mol／LTris缓冲液中，超声(2×10Hz) 1 材料和方法 粉碎细胞，4℃ 10，000rpm离心5分钟，取上清测 1．1 主要试剂和药物 酶活性及蛋白质含量。 艾迪注射液由贵州益佰制药有限公司生产，磷 鸟氨酸氨基 甲酰转移酶 (OCT)按Ohshita等 酸吡哆醛、果糖 1，6-二磷酸、氨基 甲酰二锂磷酸盐、 的方法测定，酪氨酸一o一【酮戊二酸转氨酶 (TAT)按 二乙酰一肟和 L．瓜氨酸为 (SIGMA公司)，RPMI一 Diamondstone分光光度法测定，碱性磷酸酶 (ALP) 1640培养基为(GIBCO公司)，L．酪氨酸和二羟丙酮 按Bowers等人的方法测定，一谷氨酰转酞酶活性按 为(BDH公司)，氨基硫脲为(FLUKA公司)，尿素酶 Huseby方法测定，醛缩酶活性按Sibley等人的方法 为(SERVA公司)，甲胎蛋白放免试剂盒由上海锐聪 测定，蛋 白质含量按Lowry法测定。 科技发展有限公司生产。 2 结果 1．2 方法 2．1 艾迪注射液对 Bel-7402细胞增殖的影响 1．2．1 细胞株及培养条件 Bel-7402人肝癌细胞 2．0mg／ml艾迪注射液处理细胞增殖有明显抑 株由广州医学院肿瘤研究所提供，接种于 10％小牛 制，8．0mg／ml艾迪注射液处理细胞增殖几乎停止， 血清RPMI．1604培养液中，在 37℃ CO：温箱中培 表明有一定的毒性反应，故以下试验均用4．0mg／ 养。 ml艾迪注射液进行。 1．2．2 细胞分化实验及测定方法 艾迪注射液，使 2．2 艾迪注射液对细胞 AFP分泌量、r-谷氨酰转肽 用时以1640稀释至所需浓度，按所需溶度加入培养 酶 (FGT)和醛缩酶 (ALD)的影响 液后 ，用 1mol／LNaOH调节至 pH7．4。用 0．5、 4．0mg／ml艾迪注射