固相酸解法制备古糖酯寡糖及其电喷雾质谱分析.pdf

V01．29 高等学校化学学报 No．7 2008年7月 CHEMICALJOURNALOFCH玎忸SEUNⅣERSITIES 13“～1348 固相酸解法制备古糖酯寡糖及其电喷雾质谱分析 赵峡，付海宁，于广利，王金霞，李小军，管华诗 (中国海洋大学医药学院，海洋药物教育部重点实验室。青岛266003) 摘要以褐藻酸中分离的聚古罗糖醛酸(PG)为原料，以三氧化硫-吡啶为硫酸酯化试剂，采用正交实验法确 定了制备高硫酸酯基取代古糖酯(Pcs)的最佳工艺条件，并采用2D．NMR分析对其结构进行了确证．本文建 立了一种新的环境友好型固相酸解方法以制备PGS的寡糖(即采用732。阳离子交换树脂这种固态酸对PIGS 进行降解)．结果表明，当732。阳离子交换树脂用量为200 m∥IIlL、P(葛的质量分数为2％时，在100℃下降 解6h可得到重均分子质量(帆)小于3000的PGS寡糖，经Bio—GelP6凝胶层析柱分离可以得到13个聚合 度单一的寡糖组分F1一Fm电喷雾质谱(Esl—MS)分析结果表明，Fl—F”分别是聚合度为1一13的PGs寡糖． 关键词固相酸解；古糖酯；寡糖；电喷雾质谱 中图分类号0657；0629文献标识码A 文章编号0251聊90(2008)07一1344旬5 褐藻酸是由卢-D一甘露糖醛酸(Mann啪nicacid，M)和a．L一古罗糖醛酸(Gulur}onicacid，G)组成的二 和与肝素相似的结构特性，在抗凝、抗炎、抗肿瘤和抗尿路结石等方面显示出了良好的应用前景嵋．3J． 由于硫酸多糖具有较大的相对分子质量并带有较高的负电荷，大多难以穿越人体的正常生理屏障和细 胞膜，存在口服吸收差和生物利用度低等问题HJ．寡糖，尤其是硫酸寡糖，由于具有结构明确、吸收好 J． 及副作用小等特点，对其进行研究与开发已引起了人们广泛的兴趣怕’6 目前，褐藻寡糖的制备主要有酶降解、氧化降解和酸降解等方法．酶法降解条件温和，选择性强， 但易在非还原端形成不饱和双键o¨；氧化降解效率较高，但降解产物较复杂，且易在还原端开环形成 羧基旧o；酸法降解可使糖苷键发生断裂，得到的寡糖能保持分子固有的结构特征，但存在较为严重的 “三废”污染和设备腐蚀等问题，且中和时易产生大量的无机盐杂质．基于732’阳离子交换树脂分子骨 架中含有—OsO，H这种强酸性基团，本实验将732。氢型树脂应用于PGs的降解(本文称之为“固相酸 进行了分析，为进一步开展PGS寡糖与蛋白的相互作用研究奠定了基础． 1 实验部分 1．1试剂与仪器 褐藻酸钠(粘度150t—tPa·8，中国海洋大学兰太药业有限公司提供)；系列葡聚糖标准品(相对分 公司)；D：O(纯度99．96％，美国CaIIIbridgeIsotope实验室)；其它试剂均为国产分析纯． HealtllcaIe G3000PwxL，300mm×7．8咖，日本To∞h公司)；冷冻干燥 Bio-sciences公司)；凝胶色谱柱(Tsl(gel 仪(Ez550Q，美国兀s公司)；超导核磁共振波谱仪(J甜州M—EcP600M，日本电子株式会社)；四极 杆飞行时间串联质谱仪(Mic咖舱s8 Q-TOF 收稿日期：2008旬】彤。 基金项目：国家。十五”重大专题项目(批准号：2002从2乃145)和国际科技合作项目基金(批准号：200r7D嗍80)资助． 联系人简介：赵峡，男，博士，副教授．主要从事糖类药物化学研究．E—mil：蜥8@伽c．edu．恤 万方数据 No．7 赵峡等：固相酸解法制备古糖酯寡糖及其电喷雾质谱分析 1345 统，美国wate璐公司)． 1．2 PGS的制备