块根特异启动的木薯SBE Ⅰ、SBEⅡ基因RNAi载体的构建及鉴定.pdf

热带作物学报201 1 1．32(8)：1507-151 Chinese Journalof TropicalCrops 块根特异启动的木薯SBE lI基因 I、SBE RNAi载体的构建及鉴定 弓淑芳1·2，郭安平2‘。郭运玲2．孔华：。阳辛凤2．贺立卡： 1海南大学农学院．海南海口570228 2中国热带农业科学院热带生物技术研究所。海南海口571101 摘要利用基因重组技术．分别克隆木薯SBE 片段；并通过重叠延伸PCR方法。扩增融合SBEI、SBEII基因片段的大片段SⅢ，将其正向、反向插入植物 RNAi表达载体pART27中。同时克隆块根特异性启动子取代原来载体上自有的35S启动子，构建块根特异启动的 可编码发夹结构的RNAi表达载体Sp-pRNAiSm。为后续培育高直链淀粉含量的木薯新品种等实验打下基础。 关键词木薯：高直链淀粉；RNA干扰技术；重叠延伸PcR 中图分类号$533：Q78 文献标识码A RNAi ConstructionandIdentificationof Vector Containing CassavaSBE lIGeneandRoot Promotor I。SBE Specific GONG Lika2 Yunlin92，KONGHua2，YANGXinfengz，HE Shufang啦，GUOAnpin92，GUO 1 571101 CollegeofAffonomy,HaitwmUniversity,Haikou 2Institute Bioseienceand s7nol ofTropical Biotechnology,CATAS,Haikou AbstractA494 namedSIfromthe SBEI anda340 Frame(ORF)of bpfragment OpenReading bpfragment namedSⅡfromtheORFofSBEⅡwe陀clonedfromcassavaandfusedintoa namedSⅢwith largerfragment Extension PCR)．The w踞insertedintothe vector Overlap PCR(SOE SⅢfragment plantexpressionpART27 RNAiinforwardandrevelse the 35S inthevectorWag witharoot direction；Also originalpromotor replaced