CAT基因敲除对热带假丝酵母产DCA13代谢网络的影响.pdf

第57 卷 第9 期 化 工 学 报 VoI. 57 No. 9 2006 年9 月 JournaI of ChemicaI Industry and Engineering （China ） September 2006 。。。。。、 。 、 研究论文 CAT 基因敲除对热带假丝酵母产 DCAl3 、 。 、。。。。。 代谢网络的影响 高 弘，黄英明，刘 铭，张 剑，华玉涛，曹竹安 （清华大学化学工程系生物化工研究所，北京 l00084 ） 摘要：肉毒碱乙酰转移酶在脂肪酸! -氧化过程中起着重要作用. 利用同源重组技术，构建了热带假丝酵母CAT 基因单拷贝缺失菌CZ-l5 和双拷贝缺失菌CKC-ll 后，发现CZ-l5 的 -氧化过程受到抑制，与原始菌Fl0-l 相比， ! 十三碳二元酸的产量和烷烃转化率都得到了明显提高，菌体生长情况与Fl0-l 基本一致；CKC-ll 则无法代谢烷 烃，菌体生长也受到了较大的影响. 采用代谢动力学模型对发酵数据进行了计算与分析，实验结果与模型相符. 根据实验和模型计算结果完善了热带假丝酵母代谢葡萄糖和十三碳二元酸的途径. 关键词：十三碳二元酸；热带假丝酵母；代谢网络；重组菌 中图分类号：TO 92l. 7 文献标识码：A 文章编号：0438 - ll57 （2006 ）09 - 2l57 - 05 Effects of CAT gene knockout on DCAl3 metabolic network of Candida tropicalis GAO Hong ，HUANG Yingming ，LIU Ming ，ZHANG Jian，HUA Yutao ，CAO Zhu’an （Institute of Biochemical Engineering ，Dep artment of Chemical Engineering ，Tsinghua Uniuersity ，Beij ing l00084 ，China ） Abstract ：Carnitine acetyItransferase pIays an important roIe in ! -oxidation of fatty acid. Candida trop icalis can assimiIate n-aIkane as a soIe carbon source and produce dicarboxyIic acids. Starting from a DCA producing strain ， Fl0-l，CAT singIe and doubIe-knockout strains ，CZ-l5 and CKC-ll were constructed. The resuIts showed that CZ-l5 had the same growth characteristics as Fl0-l，and due to inhibition of ! -oxidation ，CZ-l5 increased DCAl3 yieId and moIar conversion of aIkane ；however ，CKC-ll