壳聚糖凝胶固定葡萄糖氧化酶制备酶电极的工艺.pdf

食品与发酵工业 B**C 8AC BDE7DAF8F5*A GACH4FE5D4 I*J ? , )* ? K 壳聚糖凝胶固定葡萄糖氧化酶制备酶电极的工艺! ! 冉 旭 冉均国 苟 立 王方瑚 （四川大学食品科学与工程系，成都， ） （四川大学无机材料系，成都， ） ! #!$$#% #!$$#% 摘 要 以壳聚糖作为固定’( 载体，研究了壳聚糖溶液的粘度，交联剂戊二醛的浓度、用 量以及铂丝在酶膜母液中浸涂时间等对葡萄糖传感性能的影响。在优化固定化条件的基础 上，建立了通过调整固定化条件来适应载体溶液粘度变化的工艺，制备出性能基本一致的酶电极。 关键词 壳聚糖，降解，葡萄糖氧化酶，固定，酶电极 壳聚糖具有良好的生物相容性，对酶有 化酶电极必须了解载体降解性能及固定化条 较好的亲和力，安全无毒、价廉易得。从结构 件对电极性能的影响，找出制备性能基本一 上看其分子链上有许多可参与反应的基团， 致的酶电极的方法。 可按要求进行改性，因而人们对其在食品加 ! 实验材料与方法 工、医学用材、药物以及膜化学、固定化酶载 ［ ］ 体等方面的应用进行了广泛研究! 0 # 。壳 ! ! 试剂及仪器 聚糖溶于酸性水溶液，呈粘稠液体，具有一定 壳聚糖，浙江玉环县化工厂；葡萄糖氧化 粘度，在一定条件下可成为薄膜或凝胶，非常 酶， 化学公司（ ），成都美乐 45678 . ,$$ 92 6 适合用作固定化酶的载体。 医疗保健品有限公司进口分装，浓度 %$ 3 。 制备固定化酶的方法大致分1 类：吸附 其他试剂均为市售分析纯商品。 法、共价法、交联法、包埋法。本试验选用包 纳安电流仪，中科院感光所； 旋 )(:;! 埋法。以此法制备酶电极操作简单，基本可 转粘度计，上海天平仪器厂； 型精密 =;( 以保持酶的高活性（呈自由态）。研究采用葡 酸度计，成都仪器厂。 萄糖氧化酶作为生物识别成分，以壳聚糖为 ! # 壳聚糖溶液的制备 载体，将其固定在铂丝电极上作为转化器的 将!3 的醋酸水溶液在常温下搅拌过 酶电极，通过转化器2 分析物界面的电化学反 夜，制备约 ?1 3 的壳聚糖溶液，滤去溶液中 应，直接得到与所测定的葡萄糖浓度线性相 的不溶物制得作电极载体的壳聚糖溶液，低 关的电信号，用于食品品质的监测控制和分 温保存待用。 析检测，以及糖尿病人血糖的诊断、治疗等。 ! $ 葡萄糖氧化酶电极的制备 壳聚糖采用 !3 的醋酸溶液来溶解，溶 吸取一定体积的壳聚糖溶液，按一定体 液的制备及存放时，壳聚糖都要发生长链的 积比加入 % 62 @ 的葡萄