大孔吸附树脂分离纯化谷胱甘肽(GSH)的研究.pdf

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第;蕊荤;膂 发酵科技通讯 大孔吸附树脂分离纯化谷胱甘肽(GSH)的研究 苑成伟 王家骐 朱立江 (河北梅花味精集团公司河北廊坊065702) 分离纯化GSH工艺可行。 关键词:谷胱甘肽;分离纯化;大孔吸附树脂 谷胱甘肽是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸文通过研究对啤酒废酵母的预处理及细胞的破 缩合而成的含巯基的生物活性三肽化合物【11。普遍存 碎,得到富含谷胱甘肽的酵母抽提液,将抽提液上 在于细胞中,是一种重要的抗氧化剂,在动物组织, 离子交换柱分离,研究了离子交换树脂对GSH的 植物组织,细菌和酵母内巯基(s}D最为丰富的化合静态吸附量及洗脱条件对分离纯化产品的影响。 物,有护肝、解毒、抗氧化等多种医疗功能,被称为长 最后使用HPLC对所得GSH产品进行了鉴定。采 寿因子和抗衰老因子回。目前GSH的主要生产厂家 用D001大孑L吸附树脂分离纯化GSH目前未见 有J.T.Baker、BDH、Fluka、E.Merck、Riedel--deHaen、文献报道。 Sigma及13本和光纯药等国外公司。其应用正引起 1材料和方法 人们日益广泛的注意,国内市场空间广阔131。现GSH 的国产化,不仅可改变我国谷胱甘肽依赖进口的局 1.1材料 面,而且对我国医药工业,临床医学和食品工业具有 1.1.1试验材料 重大的社会效益和经济效益。 啤酒酵母:由上海复旦大学提供。 报道的GSH的分离纯化方法主要有铜盐法, 1.1.2主要试剂 双水相法和树脂法。铜盐法因其污染严重,收率 大孑L型弱酸性丙烯酸系阳离子树脂(D001), 低,其发展受到滞控;双水相法效果较好,但双水 廊坊电力树脂厂(功能基团-SO,H,全交换容量 相系统设备昂贵,操作条件苛刻,实现其工业化较 为困难,目前还只处于实验阶段;树脂法具有污染 小,操作便利,经济效益好等优点,目前在食品医 那司科技有限公司);亚硝基铁氰化钠;氨水;硫酸 药等领域广泛应用。国外用树脂法提纯食品医药 铵;95%乙醇;85%磷酸;考马斯亮蓝G一250;均为 已有多篇日文专利和文献报道,【4J发展日趋成熟。 国产分析纯。 大孔吸附树脂是一类新型的多孔性高聚物吸 1.1.3试验仪器 附剂,其分离机理为吸附原理和分子筛原理,主要 ①2.6cmx60cm玻璃层析柱; 通过分子间作用力如范德华引力或氢键等对被吸 752型紫外可见光光度计(上海光谱仪器有 附的分子进行吸附,吸附剂表面的亲水性或疏水 限公司); 性决定了其具有不同的吸附特性;同时本身的多 LGJ一12冷冻干燥机(北京松源华兴科技发展 孑L性结构亦决定其具有一定的分子筛作用旧。本 有限公司); 万方数据 9 2XZ-2型旋片真空泵(浙江黄岩求精真空泵厂); 说明样品中存在交换能力强于GSH的氨基 BSZ一100自动部分收集器(上海沪西分析仪 酸或多肽类物质,它们与GSH竞争离子交换,被 器厂); 优先吸附于树脂柱上,而部分大分子蛋白质则被 BT-101电子蠕动泵(上海沪西分析仪器厂)。截留在大孔树脂空隙中,从而去除了部分不吸附 1.2试验方法 的蛋白质和吸附能力比GSH强的小分子物质,最 1.2.1GSH的提取制备 终达到GSH的提纯效果。收集GSH高峰区样品, 采用酒精浸提法制取GSH抽提液[sl。 可进一步达到优化效果。 1.2.2树脂的预处理[61 2

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