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专题九 生物科技与技术实践 考纲要求 内容 要求 1.基因工程 基因工程的诞生 Ⅰ 基因工程的原理及技术 Ⅱ 基因工程的应用 Ⅱ 蛋白质工程 Ⅰ 2.克隆技术 植物的组织培养 Ⅱ 动物的细胞培养与体细胞克隆 Ⅰ 细胞融合与单克隆抗体 Ⅱ 3.胚胎工程 动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础 Ⅰ 胚胎干细胞的移植 Ⅰ 胚胎工程的应用 Ⅱ 4.生物技术的安全性和伦理问题 转基因生物的安全性 Ⅰ 生物武器对人类的威胁 Ⅰ 生物技术中的伦理问题 Ⅰ 5.生态工程 阐述生态工程的原理 Ⅱ 生态工程的实例 Ⅰ 6.酶的应用 酶的存在与简单的制作方法 酶活力测定的一般原理和方法 酶在食品制造和洗涤等方面的应用 制备和应用固相化酶 （1）能独立完成“生物知识内容表”所列实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验的方法和技能进行综合运用 （2）具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理 （3）能对一些简单的实验方案作出恰当的评价和修订 7.生物技术在食品加工及其他方面的应用 （1）从生物材料中提取某些特定的成分 （2）运用发酵加工食品的基本方法 （3）测定食品加工中可能产生的有害物质 （4）植物的组织培养 （5）蛋白质的提取和分离 （6）PCR技术的基本操作和应用 基因工程 ★目的基因的获取： 分为直接分离基因、人工合成基因。 人工合成法 反转录法 mRNA单链 DNA双链DNA 专一性强，目的基因不含内含子 操作麻烦，mRNA存在的时间短，技术要求高 根据已知氨基酸序列合成 通过测出的核苷酸序列，通过化学方法合成 专一性最强，目的基因不含内含子，可以合成自然界中不存在的基因 目前，复杂的、尚不知核苷酸序列的基因不能合成 基因表达载体的构建方法 载体（质粒） DNA分子（含目的基因） 同一种限制酶切割 带有黏性 带有相同黏性末端的 末端切口 目的基因片段 DNA连接酶 重组DNA（环状重组质粒） 将目的基因导入受体细胞 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用 方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法（用Ca2+ 处理） 受体 细胞 受精卵 体细胞（需经组织培养） 受精卵 原核细胞 目的基因的检测与鉴定 导入检测：DNA 分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的 DNA 片段作探针检测。 转录检测： 分子杂交法，即目的基因作探 表达检测 针与 mRNA 杂交 翻译检测： 抗原—抗体杂交法 个体生物学水平鉴定： 转基因生物是否具有抗性或转基因产品的功能活性。 细胞工程 　　细胞工程包括动物细胞工程和植物细胞工程。 植物组织培养 　　植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。植物组织培养可培育繁殖速度快而且无病毒的植株，还可以通过大规模的植物、细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等，另外，还可用植物组织培养方法形成的胚状体，包裹上人工种皮，制成人工种子。 过程名称 过程 形成体特点 条件 脱分化 由外植体形成愈伤组织 排列疏松、高度液泡化的薄壁细 胞团 ①离体 ②提供营养物质（有机 物、无机物） ③提供激素（生长素和细胞分裂素） ④提供其他适宜条件 再分化 由愈伤组织成为 幼苗或胚状结构 有根、芽或有生根发芽的能力 植物组织培养与动物细胞培养 项目 原理 培养基 结果 培养目的 植物组 织培养 细胞的全能性 固体：营养物 质、激素 培养成植株 快速繁殖，培育无病毒植株等 动物细 胞培养 细胞的增殖 液体：营养物质、动物血清等 培育成细胞系 或细胞株 获得细胞的产 物或细