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江西医学院学报 2009 年第 49 卷第 3 期  Act a Aca demi ae Medicin ae J i a n gxi 2009 , Vol 49 , No 3 ·1 · 大鼠胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定研究 a b b c 周小兵 ,邹安琪 ,江志群 ,刘德华 (南昌大学 a . 研究生院医学部 2006 级 ; b . 第一附属医院神经外科 ; c . 第一附属医院检验科 ,南昌 330006) ( ) 摘要 : 目的 探讨大鼠胚胎神经干细胞 N SCs 的分离 、培养 、分化及鉴定的条件与方法 。方法  分离孕 14 ~16 d ( ) SD 大鼠胚胎脑皮质及皮质下区域 N SCs ,无血清培养基 DM EM/ F12 ,含 b F GF 、E GF 、B27 等 条件下培养 ,通过有 限稀释法克隆、传代 ,含血清培养基诱导分化 ,免疫组织化学法鉴定 N SCs 及诱导分化后的细胞 。结果  体外培养 ( ) ( ) 的N SCs 能稳定增殖成神经干细胞球并传代 nestin 染色阳性 ,经诱导可分化为神经元细胞 N SE 染色阳性 、星形 ( ) ( ) 胶质细胞 GFA P 染色阳性 和少突胶质细胞 CN P 染色阳性 。结论  采用无血清培养基中加入特定生长因子的 培养技术 ,可在体外大量培养出稳定增殖并具有多向分化潜能的大鼠胚胎 N SCs ,为进一步研究 N SCs 的生物特性 及应用奠定了基础 。 关键词 : 神经干细胞 ; 培养 ; 鉴定 ; 免疫组织化学 中图分类号 : R - 332    文献标识码 : A    文章编号 : 1000 - 2294 (2009) 03 - 000 1 - 04 Study of Cell Detachment , Cultivation and Identif ication of the Rat Embryo Neural Stem Cell s in Vitro a b b c ZHOU Xiaobing , ZOU Anqi ,J IANG Zhiqun ,L IU Dehua (a. 2006 Gra de of M e d ical D ep a rt m ent of Gra d uate S chool ; b . D ep a rt m ent of N e u ros u rg e ry , t he F i rs t A f f i l i ate d H osp i t al ; c. D ep a rt m ent

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