安全连续封闭式细胞培养病毒生产灭活的方法.docVIP

安全连续封闭式细胞培养、病毒生产/灭活的方法 上海交通大学一种生物工程技术领域的安全连续封闭式细胞培养、病毒生产／灭活的方法，步骤为：１）接种细胞，悬浮培养，实现细胞的初级培养；２）流加新鲜培养基，同时泵出细胞悬浮液，维持细胞培养生物反应器稳定，保证细胞在反应器中的停留时间内扩增，实现细胞的连续培养；３）泵出细胞悬浮液至含有病毒的病毒增殖反应器，实现病毒在细胞中的初级感染增殖；４）随着细胞悬浮液的流入和含病毒上清液的流出，在维持整个系统动态平衡的过程中实现病毒的连续培养；５）收集从病毒增殖反应器中泵出的病毒上清液，灭活病毒，实现连续封闭培养细胞和灭活病毒。本发明便于自动化控制，标准化生产，且降低了污染机会和提高了生产安全系数。 安全连续封闭式细胞培养、病毒生产/灭活的方法 一种安全连续封闭式细胞培养、病毒生产／灭活的方法，其特征在于，包含以下步骤：　　　　１）向细胞培养生物反应器中接种１～２×１０↑［５］ｃｅｌｌｓ／ｍＬ的细胞，悬浮培养，扩增至０．２～１．０×１０↑［７］ｃｅｌｌｓ／ｍＬ，对于微载体悬浮培养时，微载体上８０～９０％汇满细胞，实现细胞的初级培养；　　　　２）根据培养细胞的生长特性和生物反应器体积的大小，以０．３～１．０倍反应器工作体积／天的流速流加新鲜培养基，同时以同样流速泵出细胞悬浮液，维持细胞培养生物反应器稳定的同时，保证细胞在反应器中的停留时间内扩增至０．２～１．０×１０↑［７］ｃｅｌｌｓ／ｍＬ，对于微载体悬浮培养时，微载体上８０～９０％汇满细胞，实现细胞的连续培养；　　　　３）泵出细胞悬浮液至含有感染复数为２～１０病毒的病毒增殖反应器，实现病毒在细胞中的初级感染增殖；　　　　４）随着细胞悬浮液的不断流入和病毒上清液的不断流出，在维持整个系统动态平衡的过程中实现病毒的连续增殖；　　　　５）用病毒收集罐收集从病毒增殖反应器中泵出的病毒上清液，灭活病毒，实现连续封闭培养细胞和灭活病毒。 200610023231 申请日: 2006年1月12日 公开/公告日: 2006年7月26日 授权公告日: 　 申请人/专利权人: 上海交通大学 国家/省市: 上海(31) 申请人地址: 上海市闵行区东川路800号 邮编: 200240 发明/设计人: 罗凤山、齐瀚实、陈彦田、孙海英、耿涛 代理人: 王锡麟 王桂忠 专利代理机构: 上海交通大学专利事务所(31201) 专利代理机构地址: 上海市华山路1954号(200030) 专利类型: 发明 公开号: 1807599 公告日: 　 授权日: 20 公告号: 0 优先权: 　 审批历史: 　 附图数: 1 页数: 9 权利要求项数: 3