小分子肽的Tricine_SDS_PAGE分离方法.pdfVIP

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小分子肽的 分离方法 T ricine SD S PA GE 曹佐武 ( 暨南大学生殖免疫中心 广东广州 510632) ( )   在蛋白质的生化分析和基因表达产物的分离纯化 国产试剂。猪心细胞色素C 自制 , 昆虫细胞无血清培 中, 经常要把某种或某些蛋白质成分分离开来。聚丙烯 养液为本实验室基因表达收集的样品。 酰胺凝胶电泳( ) 是分离蛋白质的常用生化 蛋白质微量电泳仪 ( , ) , SD S PA GE B io R ad L ab U SA M ini 方法, 样品的蛋白质分子热变性解聚后与 结合形 垂直电泳槽 ( , ) 。 SD S p ro tean B io R ad L ab U SA 成带负电的蛋白质SD S 复合物, 复合物在电泳中的迁 2 实验方法 移率取决于蛋白质的分子大小, 使用均匀浓度的 2. 1  蛋白质电泳溶液准备 SD S T ricine SD S PA GE ( ) PA GE 来分析分子量在 15~ 200kD 的蛋白质时, 电泳 正极缓冲液 10 × : 用去离子水溶解 121. 14 g 迁移率与分子量的对数成线性关系。但常规定 T ris甘 T ris, 用 1 mo l HC l 调至pH 8. 9, 定容至 500 mL 。 ( ) 氨酸盐酸系统中电泳分离分子量小于 10kD 的多肽效 负极缓冲液 10 × : 用去离子水溶解 60. 55 g T ris、 果差。作者在分离小分子肽的实验中改进了一套较简便 89. 58 g T ricine 及 5 g SD S, 加水至终体积为 500 mL 。 ( ) 的分离小分子肽的 方法。 凝胶缓冲液 3 × : 用去离子水溶解 181. 5 , T ricine SD S PA GE

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