秦皮香豆素类成分的提制和鉴定.doc

秦皮香豆素类成分的提制和鉴定 秦皮，系木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance、白蜡树Fraxinus chinensis Roxb、尖叶白蜡树Fraxinus szaboana Lingelsh或宿柱白蜡树Fraxinus stylosa Lingelsh的干燥枝皮或干皮。又名梣 针状体（热水），mp.204-206℃，为倍半水合物。难溶于冷水，溶于沸水、热乙醇、甲醇、吡啶、乙酸乙酯和醋酸。 七叶树内酯（Esculetin，又名七叶苷元、秦皮乙素） 3.棱状结晶（冰醋酸），叶状结晶（真空升华得），mp.268-270℃。溶于稀碱显蓝色荧光，尚溶于热乙醇及冰醋酸，几乎不溶于乙醚和沸水。 3.秦皮苷（Fraxin，又名白蜡树苷、梣皮苷） 水合物为黄色针状结晶，无水物为白色粉末，mp.206℃，（165℃软化）微溶于水，易溶于热水及热乙醇，不溶于乙醚。 4.秦皮素（Fraxetin，又名秦皮亭、白蜡树内酯、Fraxetol） 片状结晶（乙醇水溶液），mp.227-228℃（230-232℃）。溶于乙醇 ，微溶于乙醚及沸水。 二、实验目的 1.掌握回流提取秦皮香豆素类成分的方法。 2.学习脂溶性成分和水溶性成分的分离方法。 3.了解香豆素类成分的一般性质和鉴别反应。 4.学习各种实验技能: 提取：回流提取 分离纯化：萃取 鉴识：色谱法、化学法 三、实验原理 因为七叶苷和七叶内酯均为香豆素类化合物，能在乙醇中溶解，故采用乙醇提取。再利用七叶苷极性大于七叶内酯极性，用乙酸乙酯分离。乙醇提出的脂溶性杂质，可用三氯甲烷萃取除去。由秦皮甲素、乙素结构上的差别进行鉴别。 实验流程 秦皮粗粉150g ↓ 95%EtOH200ml,回流1小时，药渣再重复两次 乙醇提取液 ↓ 减压蒸馏浓缩至无醇味 浓缩物 ↓ 水溶液 加等体积CHCl3萃取 CHCl3 水层 （树脂等脂溶性杂质） 挥去CHCl3， 用等体积EtOAc萃取三次 EtOAc萃取液 水液 加适量无水硫酸钠↓ ↓浓缩析晶滤过 残留物 结晶 温热甲醇溶解，浓缩至适量，↓ ↓甲醇重结晶 放置析晶滤过 结晶体 秦皮甲素（七叶苷） ↓用甲醇重结晶 秦皮乙素（七叶内酯） 实验方法 乙醇总提取物的制备 取秦皮粗粉150g，用95%乙醇90℃水浴回流提取，（200ml回流1h）药渣再重复两次（ ），合并乙醇液，减压回收乙醇（45-50℃）至无醇味，得浓缩物。 分离 浓缩物加40ml水，加热溶解，将水溶液转移至分液漏斗中，加入三氯甲烷萃取（40ml×2），不断振摇放置，去除树脂等脂溶性杂质。 将三氯甲烷萃取得到的水层，挥去氯仿后，加入乙酸乙酯萃取（40ml×3），合并乙酸乙酯液，即为亲脂性成分的提取液，水层为亲水性成分。 秦皮甲素的分离 将上述乙酸乙酯萃取得到的水层浓缩至适量，放置析晶，过滤得到晶体。用甲醇反复重结晶，得秦皮甲素，作鉴识用。 秦皮乙素的分离 将上述的乙酸乙酯液用无水硫酸钠脱水，减压回收溶剂至干，残留物溶于温热甲醇中浓缩至适量，放置析晶，过滤得到晶体。用甲醇反复重结晶，得秦皮乙素，作鉴识用。 3.鉴识 色谱法鉴定 硅胶GTLC 对照品：2%秦皮甲素、秦皮乙素标准品甲醇液 样品：1%秦皮甲、乙素甲醇液 展开剂：三氯甲烷-甲醇-甲酸（6:1:0.5) 显色