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不同甲醇流加策略对重组毕赤酵母发酵生产腺苷蛋氨酸的影响.pdf
维普资讯
·756 · 齐鲁药事 QiluPharmaceuticalAffairs2006 f. ! .丝
不同甲醇流加策略对重组毕赤酵母发酵生产腺苷蛋氨酸的影响
王水莲,张建勇,刘杰,高振
(山东齐都药业有限公司 淄博 255400)
摘要:目的 考察了不同甲醇流加策略对重组毕赤酵母发酵生产腺苷蛋氨酸(SAMe)的影响。方法 在发酵过程 中改变
甲醇浓度测定外源蛋白表达量。结果 当补加甲醇的量为0.5 时,腺苷蛋氨破表~.t-a高 结论 通过合适的策略控制甲
醇的流加可提高外源蛋白表达量。
关键词:甲醇 外源蛋 白 腺苷蛋氨酸
中图分类号:TQ464.6 文献标识码:A 文章缡号:1672—7738(2006)12—0756--02
EffectsofdifferentmethanolfeedingstrategyonS-Adenosyl—L—methionnineproductionin
high—denityfermentationbyrecombinantpichiapastoris
WANG Shui*lian,ZHANGJian—yong,LIUJie,GAO Zhen
(ShandongQiduPharmaceticalLimitedCorporation,ZiBo,255400)
ABSTRACT:OBJECTIVE Fourdifferentmethanolfeedingmethodswereevaluated in theS-Adenosyl—L-methionnine
(SAMe)productioninhigh—denityfermentationbyrecombinantpichiapastoris.METHODS Changesthemethanoldensityde—
terminationextraneoussourceproteinexpressionquantityinthefermentativeprocess.RESULTS Whenthesupplementmetha—
nolquantitywas0.5 ,theSAMeexpressionquantitywashighest.CONCLUSION Mayenhancetheextraneoussourceprotein
expressionquantitythroughappropriatedstrategycontrolingmethnaolfeeding.
KEYWORDS:Methano1}foreignprotein;S-Adenosyl—L-methionine
自1987年Gregg等首次报道甲醇营养型毕赤酵母表达 1.2方法 将保藏菌种接种到YPD种子培养基中,在 3O℃,
乙型肝炎表面抗原蛋白以来,由于它具有表达率高、外源基 300rpm摇床中培养 16~24h后,按照 I 的接种量接入含
因遗传稳定、产物可分泌和蛋 白翻译后加工正确等优点,已 IOL培养基(10g·L叫酵母膏,10g·L|1蛋白胨,0.05mol·
成为今年来极受青睐的外源蛋白表达宿主系统。腺苷蛋氨 L.1磷酸钾缓冲液 pH6.0,13.4g·L 含有硫氨酸的酵母基
酸(S—Adenosyl—L—methionine,SAMe)是重要的生物中 本氮源,4×10 g·L.1生物素,2g·L一甘油,20g·L 甲
间体 .生物体中腺苷蛋氨酸合成酶催化ATP和甲硫氨酸生 醇,7.5g·L.1L一 甲硫氨酸)的发酵罐中进行发酵,控制
成 SAMe。SAMe参与转 甲基、转硫、转氨丙基等生化反应, pH5.0,溶解氧 (D())维持 3O 左右,约 20h后,甘油耗尽
是治疗肝硬化、抑郁症、冠心病等疾病的有效药物[1】。
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