用微生物挑战性试验评价化妆品防腐剂效果.pdfVIP

维普资讯 第4期 1999年8月 恩 ，美 岂 分析与检测 分析与检删 用微生物挑战性试验评价化妆品防腐剂效果 』^ ， ， ， ； 林惠芬主蕉 惠英 彦 (上海风凰 日用化学有限公司，上海市 日用化学I业研究所 ，上海市，200062) 摘要 微生物挑战性试验是 目前评价防腐剂效果的最为广搓和经典的检测方法。我们利用此方法对几种防腐荆 的防腐效果进行了研究，为指导实际使甩提供了依据。 关键词 微生物挑战性试验 化妆品防腐 评价 防腐剂是化妆品工业中非常重要的部分 。随 1．2．1 受试用微生物 着化妆品种类和剂型的繁多，及高科技生物原料应用 测试用细菌和霉菌均 由上海工业微生物研究所 的增加，许多化妆品公司都在积极研究防腐剂问题 提供。 (包括其品种和使用浓度)，并不断建立新的防腐体 细菌包括：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆 系 在评价防腐剂的实际效果中，应用最为广 和经 菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。霉菌包括；黑曲霉、黄曲 典的研究手段是微生物挑战性试验(microbialchal— 霉、变色 曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳 lengetesting)[3“。这种测试方法是根据化妆品生产 霉、绿色木霉。 和捎费者使用中可能存在的污染 (一次污染和二次污 实验前，将各苗种接种于合适的培养基中，于 染)，人为地将一定量的微生物 (细菌和霉菌)加入到 37℃(细菌)或 28℃(霉菌)下培养。细菌培养在 2天 产品中，然后间隔一定时问分析该产品中防腐剂对微 后，霉菌培养在 5天后，挑选适量菌落于灭菌的生理 生物的作用，按检测期间加菌产品的含菌量来评判防 盐水中，制成一定浓度的混台细菌(1×10个／mL)或 腐剂的防腐效果与否或大小，这种方法在评价防腐剂 混合霉菌悬液(1×10个／mL)，置于4℃贮放备用。 防腐效果上有很高的参考价值 1．2．2 一次加菌的28天微生物挑战试验 微生物挑战性实验在人为加菌方面，有一次性或 此方法参照美国药典(第 21版)上微生物挑战性 多次加菌。为探讨和开展这方面的工作并提供一些经 试验检测防腐剂效栗的方法。称取各受试样品30g， 验，我们尝试了两种加菌方法的微生物挑战性实验， 加入混合细菌或混台霉菌悬液，每克受检膏霜最终含 对几种防腐剂体系的防腐力进行了研究。 菌量分别为 5×10‘个细菌和 3×10个‘霉菌。然后充 1 材料与方法 分混匀，置于 28℃下。在接菌的0、7、14、2l和 28天 1．1 化妆品中常用的防腐体系 取样分析：准确称取3g样品，加到含有玻璃小珠的灭 选择了8种化妆品中常用的防腐体系按常规方 菌锥形瓶内，加入 27mL灭菌生理盐水，充分震荡混 法加入膏霜内，同时设2个对照膏霜 (不含任何防腐 匀，此悬液为 1；1O稀释液f然后再用灭菌生理盐水 剂)。防腐体系 1是0．1 国产菌霉克星；体系2是 按 10倍依次稀释。按平板倾注法计数受试品中含菌 0．1 国产菌霉克星、0．2 尼泊金甲酯、0．1 尼泊金 量，细菌培养是37C下24h 48h，霉菌培养为28℃ 丙酯；体系 3是 0．04 国产 CY-1；体系 5是国产 下3～5天。此实验用以评判防腐剂的有效与否。评 CY一1、0．2 尼泊金 甲醋