盐酸克伦特罗的酶联免疫分析试剂盒的研制-Ⅰ克伦特罗人工抗原及抗体的制备.pdfVIP

维普资讯 124 中国卫生检验杂志2004年2月第14卷笫 l ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology2004．February．14．No．1 检【测技术】 [文章编号]1(D4-8685(2004)01—124-03 盐酸克伦特罗的酶联免疫分析试剂盒的研制 一 I克伦特罗人工抗原及抗体的制备 李利东 ，宓晓黎 ，袁建兴 ，潘荣生 (1．江苏省微生物研究所，无锡 214063；2．镇江出入境检验检疫局，江苏 212008) 摘 要 [目的]酶联免疫分析试剂盒中的关键试剂是制备 CBL人工抗原和抗体。[方法]通过重氮偶联法制备克 伦特罗人工抗原，不同摩尔比的克伦特罗一牛血清白蛋白结合物免疫家兔。[结果]经 SephadexG一75柱纯化，用薄层层 析和紫外光谱确证，获克伦特罗一牛血清白蛋白结合物，间接酶联免疫分析法测试其效价 N／P1：4O96OO。[结论]重氮 偶联法成功制备CBL—BSA，并获得高效价的抗血清。 关键词 克伦特罗；人工抗原 ；抗体；制备 Studyoi1锄 enzyme—linkedimmunosorbentassaykitforclenbuterolhydrchloride一 一I genandantibody ，』Udo~g ，MIXiaoli，YUANJianxing ，PANRongsheng ．1．JiangsuInstituteofMicrobiology， 214063；2．Zle『慨 Entry—exti InspectionQuarantineBureauofP．R．C，Jia~ u210008China Abstract ClenbuterolimmunogenandnatibodywerekeyreagentsinELISA kit．Immunogenweresynthesizedbyaclenlmtemldi— azoderivativecouplde tobovines~rlMIIalbuminnadnatiserumsraiesdinrabbitsby immunizationagainstdifferentmolarratioCBL—diazo — BSA．CBL—BSAidentifidebythin—layerchromatographynadUVspectrometry．TheimmunizingpotencywasN／Pl~409600which assaybyEIA．Hishimmunizingpotencynatiesrumachievedby thismehtod． Keywords clenbuterol；immunogon；antibody；preparation [中图分类号3R446．61 [文献标识码]A 盐酸克伦特罗 (CBL)是人工合成的’肾上腺素 8受体选择 方法均利用同型双功能交联剂连接两个分子上的氨基．会产 性激动剂 ，是一种支气管扩张剂，用于治疗动物和人的阻塞性 生分子间的交联聚合 ，影响产量和质量，利用CBL芳香胺基团 支气管哮喘。2o世纪7o年代美国将其引入畜禽生产，促进肌 的特殊反应，严格控制反应条件，副产物少，是比较适合 的偶 肉生长 、减少胴体脂肪 、提高瘦 肉率 、改善生产性能。但克伦 联方法。本文采用重氮偶合法，在低温条件下 ，CBL苯环上的 特罗在动物内脏和组织中形成蓄积性残留，严重影响了动物 氨基与亚硝酸反应形成重氮盐 ，再与BSA蛋白质分子上的酪 产品食物安全性。人食入含克伦特罗的动物性食品，会引起 氨酸、组氨酸 、色氨酸残基反应形成偶氮键交联 的结合物，从 心悸、心痛 、肌肉震颤，糖尿病人还会引起酮中毒和酸中毒。 而制备出盐酸克伦特