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维普资讯 第32卷第6期 日用 化 学 工 业 Vo1．32NO．6 2002年 12月 ChinaSuffactantDetergent＆ Cosmetics Dec．2002 积雪草提取物对成纤维细胞胶原合成的影响 吕 洛 ，魏少敏 ，林惠芬 ，马来记 ，应 康 ，毛裕 民 (1．上海家化联合股份有限公司 科研部，上海 200082； 2．复旦大学 生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室，上海 200433) 摘要：应用不同剂量的积雪草苷和羟基积雪草苷作用于体外培养成纤维细胞 (HumanSkinFibroblast，HSFb) 后，通过放射免疫的方法测定实验组和空白对照组细胞上清中I型前胶原氨基端肽原 (PINP)和Ⅲ型前 胶原氨基端肽原 (PⅢNP)含量。结果显示 ：①与空白对照组相比，积雪草苷和羟基积雪草苷可有效刺激 体外培养 HSFbPINP和 PⅢNP的分泌；②积雪草苷和羟基积雪草苷刺激靶细胞 PINP和PⅢNP分泌的生 物学作用呈现明显的量效关系；③在10t,g／mL～150tegmL~量内，Ad对 HSFb刺激 PINP的分泌显示出比 Md更强的生物活性 (p0．O1)。 关键词：护肤化妆品；积雪草苷；羟基积雪草苷 ；成纤维细胞 中图分类号：TQ658 文献标识码：A 文章编号：1001—1803(2002)06—0023—03 积雪草苷 (Asiaticoside，Ad)和羟基积雪草苷 影 响 (Madecassiside，Md)为积雪草 [Centellaasiatica(L．) 1．3．1 HSFb培养上清收集 Urban]提取物中的三萜皂苷的主要成分。曾有报道， 取6孑L细胞培养板，每孑L中接种细胞 1×lO~／mL 积雪草提取物可有效促进皮肤损伤后的组织修复，特 HSFb，2mLDMEM完全培养基置于37℃，5％ co2培 别对促进胶原合成代谢方面有重要的作用l1]。本实验 养24h，细胞 达到 70～80融合 时，用 0．01molPBS 通过体外培养 HSFb的实验模型，在蛋 白水平上研究 (pH7．3)继续培养24h后，应用终质量浓度分别 为 Ad和Md对靶细胞 I、Ⅲ型胶原合成 的影响，初步 10ug／mL、20ug／mL、40ug／mL、80t-,g／mL和 150t-,g／mL 探讨 Ad和Md在皮肤损伤修复中的作用机制。 的Ad和 MdDMEM培养基溶液 (2r-L／孔)，对照孔 内 1 材料与方法 加入 DMEM培养基2r-L／孑L，实验及对照每个稀释度 6 1．1 主要实验试剂 个重复孑L；培养48h后，收集培养细胞上清。 Ad，质量分数92％和 Md，质量分数 95％均 由 1．3．2 HSFb上清 PINP和 PⅢNP蛋 白表达的测定 上海医药工业研究院钱福钢教授惠赠。DMEM细胞培 根据PINP和PⅢNP的RIAKit提供的说明书进 养基 、谷胺酰氨 、HEPES为美 国Gibco公司产品；I 行操作，最终数据经 7计数仪随机附带软件处理，获 型胶原酶为美 国Sigma公司产品；I型和Ⅲ型胶原的 得测定值，结果 以 ±s表示。 前胶 原氨基 端肽 原 (Procollagen I ofaminoterminal 1．4 统计学处理 propeptide，PINP；Procollagen Ill of aminoterminal 所有的数据用 SAS统计软件进行 t检验、方差分 propeptide，PⅢNP)放射免疫试剂