uPA和uPAR在老年急性髓系白血病中治疗前后表达的变化.pdf

主国耋生堂盘查!!!!生!旦箜!!鲞 uPA和uPAR在老年急性髓系白血病中治疗前后表达的变化 柳嘉赵松颖 郭慧梅 薛 华化罗明 郭 明 庞艳彬 (河北大学附属医院血液内科，河北 保定071000) [摘要]目的观察老年急性髓系白血病患者治疗前后骨髓单个核细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(uPAR)及血浆尿激酶型纤溶酶原激 13 4例，M215例，M3 活剂(uPA)水平表达的变化。方法应用流式细胞术及酶联免疫吸附试验检测60例老年急性髓细胞白血病患者(包括MI 例，M415例，M5 (CD87)及uPA表达高于治疗后，并且二者具有协同表迭关系，联合检测对于老年急性髓系白血病的病情监控有指导意义。 [关键词】急性髓系白血病；uPA；uPAR [中图分类号]R551．3[文献椽识碣]Ae寞章编号j 1005-9i02 尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)是成纤维细胞、单核细测血浆uPA水平。于样本孔内加入100斗l的蒸馏水后加入 50 胞、中性粒细胞、上皮细胞及肿瘤细胞等合成和分泌的一种丝 ul的血清样本，室温孵育3h，倒掉孔内液体并用缓冲液清洗 rain后加入 氨酸蛋白水解酶，通过与细胞表面特异受体uPAR(ED87)结合6次，每个孔内加入100“1的TMB，室温孵育10 而活化，继而组成了与白细胞浸润及组织重建有关的蛋白水解 100¨1的反应终止液，于450rim读取吸光值。以每个标准品的 系统¨1。研究表明，高表达uPAR的急性髓系白血病(AML)患平均吸光度为纵坐标，uPA的浓度为横坐标，绘制标准曲线。 者常出现髓外组织浸润，提示uPAR在白血病细胞游离骨髓根据每个样本的平均吸光度，在标准曲线上读出相应浓度。 腔、进入髓外组织的过程中发挥重要作用H13’。 示，进行t检验。相关分析用Pearson相关检测。 l材料及方法 1．1 研究对象2006年3月至2011年8月就诊的AML患者2结果 60例，均为初治，男38例，女22例，年龄60一74岁，按2001年 2．1 WHO髓系肿瘤分类法分型，M14例，M215例，M313例，M4 15例，M513例。将治疗前(即未治疗时)患者定义为治疗前2．2 uPAR在骨髓单个核细胞的表达流式细胞术检测治疗 组；含蒽环类抗肿瘤抗生素+阿糖胞苷联合化疗方案治疗3个 4-6．10)％， 前组骨髓单个核细胞uPAR阳性表达率为(47．59 疗程均持续完全缓解的患者定义为治疗后组。 高于治疗后组(16．72±7．13)％(P0．05)。 1．2试剂与方法uPAR(CD87)单克隆抗体购于美国BD公 2．3 uPA与uPAR的相关性治疗前两者呈明显的正相关 司，流式细胞仪测定骨髓单个核细胞中粒单细胞uPAR(CD87) 水平。采集白血病患者骨髓2ml加入乙二胺四乙酸(EDTA) 水平也有增高的趋势，治疗后两相指标都减低，亦成正相关 抗凝管，充分混匀，取50仙l置入流式细胞仪试管1和2，分别加(r=0．943)。 入20斗l鼠抗IsGl-FITC／IgG2-PE／CD45．PerCP、CD34一FITC／ CD87一PE／CIM5一PerCP，振荡器混匀，闭光孵育25～30min，加入 3讨论 BD公司生产的10倍稀释后的溶血素2ml，闭光孵育10～ 老年AML是造血系统的恶性肿瘤。目前治疗主要采取含 15