一株乙醇降解菌株的分离和鉴定.pdf

第39卷第1期 工业微生物 Vd．39No．1 2009年2月 Industrial Feb．2009 Microbiology 一株乙醇降解菌株的分离和鉴定 赵玉凤1”， 雷明科2， 吴元欣孙， 王存文2 (1．华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室，武汉430070； 2．武汉工程大学化工与制药学院绿色化工过程省部共建教育部重点实验室 湖北省新型反应器与绿色化学工艺重点实验室，武汉430074) 摘要 从湖北农田土壤中筛选得到一株ALDH活性较高的茼株，该茵株在舍0．64％乙醇的培 养基中生长较佳，且耐受0．9％的乙醛。经菌种形态学和生理生化特征，以及16SrRNA基因序列 分析，鉴定该茵株为不动杆茵(Acinetobactersp．)。该菌株在乙醇和乙醛解毒研究中有重要价值。 关键词：乙醛脱氢酶；16SrRNA基因；不动杆茼 乙醛脱氢酶(acetaldehydedehydrogenase，AL．菌株，该菌株能氧化乙醇，为后续的理论和应用研究 DH，EC1。2。1．n)属于氧化还原酶类，广泛存在于打下了良好基础。 微生物、植物和动物体内，催化乙醛(酮)与乙酸之间 1材料与方法 的转化反应。人类和其他许多动物中，线粒体乙醛 脱氢酶和乙醇脱氢酶协同作用能把对生物体有害的 1．1材料 醇类转化，因此在戒酒研究中乙醛脱氢酶受到高度 1．1．1土样 关注…；而酵母和许多细菌中的醇脱氢酶催化相反 采自湖北农田。 的反应。另外，酵母中乙醇脱氢酶(alcohol 1．1．2培养基 dehydro— genase，ADH，EC1．1．1．1)和ALDH结合，可以牛肉膏蛋白胨培养基(g／L)：牛肉膏3，蛋白胨 将乙醇氧化为乙醛，进一步氧化为乙酸，同时产生 10，NaCl NADH，使细胞在乙醇为唯一碳源的无氧条件下得 以存活。许多研究者还发现大肠杆菌、毕赤酵母和 钠、1％乙醛或1％乳酸钠作诱导剂。 痢疾阿米巴虫有依赖辅酶№m的双功能酶AD． 各种诱导剂使用终浓度梯度设置情况见表1： HE，该酶具有ALDH—ADH活性，在无氧条件下能 袁1诱导剂及其使用终浓度 将乙酰辅酶A最终转化为乙醇，并产生能量供生命 乙酸(％)0．330．67 1．001．331．672．002．332．67 活动所需。因此将来可考虑将ADHE作为抗菌治 乙醇(％)0．3lO．640．95 l。261．601．902．212．54 疗的靶标，在药物开发方面有较大潜力。而植物中 0．070．100．130．170．200．23O．27 丙酮酸钠(％)0．03 AI删的功能与动物和微生物有所不同，很多学者 乙醛(％)0．0030．0070．Ol0，0130．0170．020．0230．027 O．003 0．Ol0．0130．0170．020．023 开展了研究，目前还没有统一的定论，植物线粒体乙 乳酸钠(％) 0．007 0．027 醛脱氢酶与雄性不育可能有重要关系[2】。 1．2 实验方法 目前对乙醛脱氢酶的研究主要集中在哺乳动物