不同抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响.pdf

2012年辩48镂辩19期 and Reproduction Physiology·懿鬻蓑瓒 不同抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响 任俊玲112，马恒东1’弘，李和平2 (1。四川农业大学动物科技学院，四川雅安625014；2．河北旅游职业学院牧医系，河北承德067000； 3．南充职业技术学院，四川南充 637131) 摘 要：在LEY冷冻稀释液基础上分别添加不同浓度维生素C(0、5、10、20、40、60mmol／mL)、维生素E(0、0．2、 0．5、1．0、2．5、5．0mg／mL)、SOD(0、100、200、400、600IU／rnL)、CAT(0、50、100、200、300IU／mL)、GSH(0、l、5、 10mmol／mL)等抗氧化剂，检测冷冻一解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率、平衡后和解冻后精子 MDA含量，以观察5种抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明：在冷冻稀释液中联合添加100IU／mL SOD和200IU／mL CAT明显提高冷冻一解冻后精子活力、活率、质膜完整率和顶体完整率(P0．叭)。 关键词：精液；冷冻保存；抗氧化剂；猪 中图分类号：$828．2 文献标识码：B 文章编号：0258—7033(2012)19—0037—05 与其他家畜相比，猪精子对低温打击和冷冻都 液和BTS解冻液。冷冻稀释液I液配方：每100mL冷 000 很敏感。近年来，猪精液冷冻保存技术已经在冷冻 冻稀释液中含11 mL卵黄、1 IU／mL青 g乳糖、20 000 保存方法、冷冻保存液等方面有了重大突破，但是相 霉素、l t上g／mL链霉素，稀释液Ⅱ液：在稀释液I 对于牛、羊还存在一定差距。精子在冷冻过程中会 液的基础上添加6％的甘油。BTS解冻液配方为每 100 EDTA、 产生活性氧(ROS)，可以氧化多不饱和脂肪酸，使膜 mL解冻液液中含3．7 g葡萄糖、0．125g 0．6 发生脂质过氧化(LPO)f1]。ROS是细胞需氧代谢过程g柠檬酸钠、0．125NaHC03、0．075KCI。 g g 中产生的不稳定代谢产物，由于体内含有多种抗氧化 1．2精液的采集在四川I农业大学人工授精站选 物质，其产生和消除处于动态平衡。精液的冷冻解冻 择体质健康、性欲旺盛成年长自公猪2头，共采精19 min 过程破坏了这种平衡，精子膜的流动性下降[2]，产生氧 次。采用手握法采精，分装到10mL塑料管中，30 化损伤，从而影响精子活力、质膜完整性及形态等【3l。 内带回实验室。 ROS的产生是多渠道的，不但在精子的冷却、冷冻和 I．3猪精液平衡和冷冻程序带回实验室的精液 解冻过程中有ROS产生，甚至在精子的洗涤和离心 室温下静置2h，使精液缓慢降温到室温(20～25℃)。 作用下ROS的发生量也增加【4]。有报道表明，精子冷