人MRG15在哺乳动物细胞中表达与定位的初步研究.pdf

·1022· UniversitatisMedicinalisAnhui2013 安徽医科大学学报Acta Sep；48(9) 人MRGl5在哺乳动物细胞中表达与定位的初步研究 姜天鹏4，潘林鑫+，赵健，乔正，李春雨，张珊静，李克娟，范礼斌 摘要目的 研究细胞周期调控蛋白(MRGl5)在哺乳动物 功能的转录因子LlJ，之后发现了一系列与MORF4 细胞中的表达与定位。方法 以含人MRGl5全长cDNA序 相关的基因，其中MRGl5受关注程度很高，因其在 列的质粒为模板，PCR扩增，构建MRGl5真核表达载体，分 人体的各种组织中都广泛表达，且在多种生物中都 别利用Westernblot法和免疫荧光法检测其在哺乳动物细胞 具有高度的保守性。人MRGl5定位于染色体15， Western 株中的表达与定位。结果 blot法检测结果表明 序列全长为969 bp，编码含323个氨基酸残基的核 MRGl5在哺乳动物细胞中能有效地表达，免疫荧光法结果 内蛋白。MRGl5蛋白包含了两个主要的结构域：N 显示MRGl5主要分布在细胞核。结论MRGl5蛋白主要 末端结构域和C末端结构域，它们中间通过一段灵 在细胞核中表达，为进一步了解MRGl5的功能奠定了一定 基础。 活区域相连。MRGl5蛋白的氨基酸序列与MORF4 关键词MRGl5；蛋白表达；免疫荧光 有96％的相似性，与MRGX有89％的相似性，N端 394．2 中图分类号R341；R 上的区别最终导致了它们在功能上的差异口]。该 文献标志码A文章编号1000—1492(2013)09—1022—04 研究通过构建MRGl5的真核表达载体，利用West— ern blot法和免疫荧光法来观察外源性的MRGl5在 细胞衰老是正常细胞必须经历的阶段，而肿瘤 细胞内的表达与定位，以便为MRGl5蛋白功能的 细胞具有无限增殖能力，通过对衰老和肿瘤机制的 进一步研究奠定基础。 研究，MORF4是第一个被发现的具有诱导细胞衰老 1材料与方法 2013一01—14接收 1．1质粒、细胞和菌株含有人MRGl5全长cD— 基金项目：安徽省教育厅自然科学重点科研项目(编号： KJ2010A187)；安徽省自然科学基金(编号： 293T 170)；安徽医科大学博士科研基金(编号：HEK细胞株、感受态E．coliTGl菌株系本实验 )(J2005004) 室保存。 作者单位：安徽医科大学生命科学学院生物学教研室，合肥230032 1．2 作者简介：姜天鹏，男，硕士研究生；