低温木聚糖酶及产酶菌株的研究方法.pdf

耵综述 低温木聚糖酶及户酶菌株的研究方法 马莉坦王思宇1迟乃玉1-2张庆芳坦 1．大连大学生命科学技术学院 2．辽宁省海洋微生物工程研究中心 木聚糖酶的底物木聚糖是自然界中继纤维素之 外某些海洋生物，如：磷虾，也被报道能够产低温 后含量第二丰富的可再生资源一半纤维素的主要组 木聚糖酶。到目前为止，已报道的只有6种纯化的 成部分，因此木聚糖酶在纸浆、造纸工业、食品和 低温木聚糖酶及其特性。而国内对于低温木聚糖酶 饲料等各行业中都有广泛应用。广义的木聚糖酶是 的研究起步晚，到目前为止已报道的产低温木聚糖 指能够降解半纤维素木聚糖的一组酶的总称，包括 酶的微生物仅有青霉。因此，低温木聚糖酶及产酶 多种内切酶和外切酶。但通常所说的木聚糖酶仅限 菌株的研究对于低温木聚糖酶在工业生产和节约能 D木聚糖酶，其作用是降解木聚糖 于内切B…1,4 源方面的应用都具有十分重要的意义。 主链骨架，是木聚糖降解酶系中最关键的酶。产木 1菌株的筛选方法 聚糖酶的菌株广泛分布于海洋和陆地，在细菌、海 1．1取样 洋藻类、真菌、酵母、反刍动物瘤胃、蜗牛、甲壳 木聚糖主要存在于植物细胞的次生壁中，处于 动物、陆地植物组织和各种无脊椎动物中都存在， 木质素及其他多聚糖间，含量十分丰富。因此，取 目前研究和应用最多的是霉菌和细菌。木聚糖酶在 样地点十分宽泛，可以选择被残枝败叶覆盖的腐殖 纸浆、造纸工业、食品和饲料等各行业中都有广泛 土、污水沟、垃圾场、养牛场废料堆、牛粪、羊粪、 应用。 玉米田里的土壤、木质纤维废水、海泥、海水、海 与中温和高温木聚糖酶相比，低温木聚糖酶具 冰和冻土等。而产低温木聚糖酶菌株的取样则可选 有更松散和柔顺的分子结构，使其在低温条件下进 择海泥、海水、海冰和冻土等。采样地点十分重要， 行酶促反应时具有更低的活化能、米氏常数值及催 只有从富含半纤维素的低温环境中采取样本，才有 化反应温度。这些特点可以加强其对底物的亲和力， 可能筛选出产低温木聚糖酶产生菌。 提高底物利用率，从而降低能耗，提高产品质量。 1．2筛选方法 另外，利用低温木聚糖酶在高温条件下对热敏感的 1．2．1固体平板筛选 特点，可以通过提高温度使其变性失活，从而控制 为了提高筛选低温木聚糖酶产生菌的效率，可 酶水解程度，使产物的性能不受损害。以上这些特 采用富集培养，用桦木木聚糖、榉木木聚糖、玉米 点都是中温和高温木聚糖酶无法比拟的。 芯木聚糖和燕麦木聚糖等作为富集培养物，在培养 近年来。国内外对木聚糖酶的研究已比较深 基中