p量子点在标记免疫分析中的应用研究进展.pdfVIP

维普资讯 临床检验杂志2007年第25卷第 1期 ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience，2007，Vo1．25，N0．1 73 文章编号：1001_764xf2007)O1~073_02 中围分类号：R446．6 文献标识码：A ·综述与进展 · 量子点在标记免疫分析中的应用研究进展 王传涛，刘道杰，王术皓(聊城大学化学化工学院，山东聊城252059) 关键词：量-t-点；标记免疫分析；临床应用 免疫分析 (ImmunoassayIA)是利用抗原抗体的特异性反 量子点的水溶性增强 ，还可以与生物大分子 (蛋白质 ，多肽， 应进行定性和定量的分析技术。标记免疫分析就是标记技 核酸等)结合。 术与免疫反应相结合的分析技术，由于标记物的放大效应可 也可以通过静电引力、氢键作用或特异的配体一受体相 提高分析方法的检测灵敏度。在传统标记免疫分析技术中。 互作用将生物分子与量子点结合。到目前为止，主要的偶联 放射免疫分析 (RIA)存在污染 ，酶免疫分析 (EIA)灵敏度较 方法有 以下几种。 低，发光免疫分析 (LIA)和荧光免疫分析 (FIA)发光时间短， 2．1 利用化学键进行偶联 一般对量子点表面进行亲水性 容易猝灭。寻找高效的标记试剂一直是人们孜孜以求的工 处理，使其具有亲羧基、氨基、巯基等的活性基团。或用聚乙 作，早在20世纪7O年代就引起科学家重视的量子点由于 良 二醇、聚丙烯酸等以共价偶合的方式包被量子点，还可以用 好的光电性能重新引起 了人们的广泛关注，开始在标记免疫 生物素、链亲合索、卵 自素等包被量子点，使其获得活性基 分析中初步应用，并取得了令人满意的效果。本文就量子点 团 。 。利用量子点和生物分子间活性基团的键合作用即 的特性，与生物大分子的偶联方式及其在标记免疫分析方面 可实现两者的偶联。 的应用研究做一综述。 2．2 利用静电力进行偶联 通常先把一活性基团连在量子 1 量子点的特性和优点 点上，同时用另一活性基团修饰生物大分子，利用两活性基 量子点(quantumdot，QD)又叫半导体纳米微晶体，大小 团的静电作用力即可将量子点与 目标分子结合 。 一 般在 1--100nm之间。由于尺寸很小，电子和孔穴被量子 3 量子点在标记免疫分析中的应用 陷域，连续能带变成分立能级结构，能够接受激发产生荧光， 随着量子点制备和偶联技术的不断成熟，它已在标记免 因此它实际上是一种探针。目前应用较多的是 Ⅱ一Ⅵ族或 疫分析中得到了初步应用，已报道的工作主要集中在把它作 Ⅲ一V族元素组成的纳米微粒。主要有 CdY(Y为 S，Se， 为荧光探针使用。 Te)，还有一些复合结构以及多层结构。与传统的标记试剂 文献 将 CdSe—ZnSQDs表面用巯基琥珀酸处理并与抗 相比，量子点有以下特性。 体连接后用作高通量蛋白质芯片的荧光标记物，采用非均相 1．1 量子点具有尺度效应和优 良的发光性能 量子点的粒 夹心法在微阵列芯片上形成抗体-抗原一检测抗体结合体，用激 径越小，其表面积就越大，表面的原子就越多，表面束缚能就 光共聚焦扫描法检测这一结合体的荧光信号，实现了微阵列 越大，吸收的能量也就越大，即存在尺度效应。量子点的激 芯片上的免疫分析，并与有机荧光标记化合物花菁染料Cy3 发波长范围很宽，对激发光源的要求不如有机试剂和镧系元 和Cy5 作了比较。在一块蛋白质芯片(75mm ×25lllm)上， 素那么苛刻，这就为用同一波长的光来激发不同粒径 、不同 用半导体纳米晶体可以同时进行2种抗体或抗原的检测。 种类的量子点提供了可能。此外量子点的荧光发射光谱也 Wu等 采用荧光免疫法 ，利用直径在 7．4—10nm的 很宽，单个量子点的荧光峰狭窄且对称，光谱之间不重合或 CdSeZ·nS量子点标记了细胞。他们先用疏水的改良聚丙烯 很少重合，用它做标记物可显著提高分