单分散大尺寸金纳米颗粒的可控制备及其应用于免疫层析法检测心肌肌钙蛋白Ⅰ.pdf

·临床研究· 单分散大尺寸金纳米颗粒的可控制备及其 应用于免疫层析法检测 心肌肌钙蛋白I 陆鹏 郭志睿 张娟 刘静宁 张梦瑶 鲁翔 【摘要】 目的 可控制备不同直径的单分散胶体级金纳米颗粒(AuNPs)，并将其应用于免疫层 析法定性检测心肌肌钙蛋白I(cTnI)，评估其检测效果。方法 以小尺寸AuNPs(15nm)作为生长 中心(种子)，采用种子生长一热熟化法，成功地制备了四种单分散、大尺寸、柠檬酸钠稳定的胶体级 nm、40nm)。六种尺 AuNPs。作为对照，采用传统柠檬酸钠还原法，制备两种常规尺寸的AuNPs(20 寸AuNPs均标记鼠源cTnI单克隆抗体，滴于聚酯结合垫上制成AuNPs结合物垫(金标垫)，将与金 标垫抗体配对的鼠源抗人cTnI单克隆抗体和羊抗鼠多克隆抗体分别包被检测线和质控线，组装成免 疫层析试剂盒检测cTnI，从试剂盒信号强度、灵敏度、特异性、稳定性方面对其进行评估。并将四种 大尺寸AuNPs制作的试剂盒与常规尺寸AuNPs制作的试剂盒进行检测效果对比。选取四种大尺寸 AuNPs制作的cTnI免疫层析试剂盒中检测效果最佳者进行临床样本检测及与商品试剂盒做检测效 nm、79nm、 果比对。 结果采用种子生长一热熟化法制备的大尺寸AuNPs直径分别为50nm、65 102 nm，尺寸分布呈单分散性。四种大尺寸AuNPs制作的免疫层析试剂盒检测cTnI，其信号强度优 nm 于采用20 AuNPs制作的试剂盒(均P0．01)，65nm的AuNPs制作的试剂盒其信号强度优于各 尺寸试剂盒(均P0．01)。其最低检测限为0．50 nm的AuNPs制作的cTnI试剂盒 gg／L。应用65 检测100份血清，与化学发光免疫分析法结果进行对比分析，阳性符合率为97．3％，阴性符合率为 100．0％；其灵敏度及同一cTnI标准品浓度下检测信号强度优于艾博公司和博天科智公司同类产品 (均P0．01)。结论种子生长一热熟化法可控制备直径为50～100nm单分散、大尺寸、柠檬酸钠 nm的AuNPs 稳定的AuNPs，使得各类大尺寸AuNPs免疫层析试剂盒的研发成为可能。直径为65 可作为cTnI免疫层析试剂盒的新选择。 【关键词】金； 纳米粒子；粒子大小； 免疫测定；肌钙蛋白I Size-controlledof fordetectionofcardiac I preparationmonodispersegoldnanoparticles troponinby JMnn，LiuJ immunochromatographyassayL“Peng，GuoZhirui，Zhang ingning，Zhang Geriatrics，theSecond to Mengyao，LMXiang．Departmentof HospitalAffiliatedNa嘶ing Medical 210003，China University，Na嘶ing author：Lu CorrespondingXiang，Email：luxiangl966@sina．eom To the monodisperse，colloidalgoldnanoparticles(AuNPs)with [Abstract