利用ISSR标记解析黔东南玉米地方种质的遗传多样性.pdf

资源与利用 李金礼等：利用ISSR标记解析黔东南玉米地方种质的遗传多样性 ·资源与利用· 利用ISSR标记解析黔东南玉米地方种质的遗传多样性 李金礼1，施文娟2，阮仁超3。赵德刚1。文晓鹏1 (1．贵州大学／贵州省农业生物工程重点实验室，贵阳550025； 2．贵州省种子管理站， 贵阳550001；3．贵州省农作物品种资源研究所，贵阳550006) OHGenetic ofMaize inSoutheastof Analysis Diversity Germplasm Region GuizhouISSR Using Markers LI Jin-lil，Sill Wen-juan2，RUANRen-cha03，ZHAODe．gan91，WENXiao．pen91 摘要：采用ISSR标记技术对来自贵州省黔东南州的43份玉米 差异，本研究搜集了来自该地区13个县的43份本土 地方种质遗传多样性进行了评价。结果表明，用筛选出的17 资源(表1)作为试验材料。 条引物进行PCR扩增，共扩增出清晰、重复性好的谱带261条。1．2方法 其中257条具有多态性，多态性比率为98．5％。品种间遗传多 1．2．1玉米总DNA组的提取 样性分析表明。其遗传相似系数变化范围为0．579—0．828。以 将玉米种子在恒温培养箱中，27℃恒温培养至两 ISSR构建的指纹图谱表明，其中有2条引物能有效地将43份 片真叶时收集叶片。按植物基因组DNA提取试剂盒 玉米资源完全区别。表明贵州省黔东南州地方玉米种质问存 (目录号：DP 在着丰富的遗传多样性。 buffer 叶片中的基因组，并用0．8％琼脂糖在1×TAE 关键词：玉米；遗传多样性；DNA指纹；ISSR标记；黔东南 中图分类号：S513；S326文献标志码：A 中5V／era电泳0．5h后凝胶成像系统中拍照检测 文章编号：1001—4705(20a0)12伽61-05 DNA的纯度及完整度。用紫外分光光度计检测其质 量和浓度后，用TE缓冲液稀释提取的DNA至同样浓 贵州生态环境复杂多样，地形地貌和气候特殊，蕴 度后放入一20℃冰箱储存备用。 藏着丰富的玉米种质资源，是国内玉米地方品种较丰 1．2．2引物筛选及PCR扩增 富的地区之一【1。J。黔东南州玉米地方种质资源非常 参照彭海、景建洲所采用方法进行PCR体系优化 丰富，但涉及其遗传多样性的研究少见报道，不利于发 及引物筛选一．10】。经过优化的ISSR扩增反应体系为 掘及利用这些优良种质。作物种质资源评价的方法较 多，包括形态学水平、细胞学水平和分子水平的标记， PCRMasterMix 201， 弘l，2×Taq 7．5弘l(目录号：KT 其中DNA水平的简单序列重复区