大环内酯抗生素抑制气道粘液高分泌的分子机制.pdf

‘354’ 中阳抗，}泰杂志2002年6，{第27卷第6朗 ——～———————一————————～————————————————————————————～—————～—— 文章编号：I(洲一8689{2002】06-03544}， 大环内酯抗生素抑制气道粘液高分泌的分子机制 周向东李升锦蒋幼凡 重庆匡秽大学第二附属医院呼吸科． 重庆4“X)lO) 摘要： 为r解火环内酯抗生索抑制慢性炎症气道牯液高分泌的舒子机制。利用人鼠慢件支气管炎模 型，对其进行主要抗生素品种的持续药物r预后，采用免疫荧光和免疫酶联方法分％JJ拉洲支气管肺泡灌洗液 中性粒细胞(PMN)炎性反应强度(PMN比例×膜结合弹力酶水平)和粘蛋白(MUC)含草．采用原化杂交方法 检测肺组织MLCd—c转录水平的表达。红霉素、克拉霉素均可明显抑制PMN炎性F互应强度．Ⅲ时也减少灌洗渡 MUC含量．杯状细胞独立标记物MU岛。。的转录水平出现显著下降，阿莫曲林和环内沙早末虻}-述件Ⅲ太 环内酯抗牛素nT眦从转录水平抑制MUC的产生．其作用机制可能与其抗炎效虚有天 关t词： 大环内酯；慢性支气管炎；牯液高分泌 中圈分类号：R969 文献标识码：A 气道粘液高分泌是慢性气道炎症的共同临床病理 各组大鼠麻醉后颈部切丌插入气管导管．4℃无钙 特征。过度分泌的粘液一方面加重了气道的阻塞，另 镁Hanks液5 rIlI灌洗2次，回收支气管怖泡蘸洗液 一方面又恶化了抗生素在气道内杀菌的微环境条件， (BALF)，取沉淀物涂片。涂片行瑞氏染色，油镜下每 救目前认为气道粘液高分泌已成为影响慢性阻塞性肺 张涂片计数1(30个细胞，计算中性幸立细胞(PMN)所占 疾患(COPD)病情和预后的独立危险因素。近些年国细胞总数的比例。另一片经短暂固定后经常规免疫荧 内外较多研究表明大环内酯抗生素除抗菌作用外，尚 光检测方法制片，兔抗人白细胞弹力酶抗体(荚国 有许多抗菌外效应，如抗炎、增加胃动力等．．许多临床 Siena公司)。封片后经荧光显微镜观察及图象分析系 研究也显示使用大环内酯抗生素可明显减少气道炎症 统半定量100个细胞，取均值后与正常对照组相比得 患者的粘痰泌出量。但目前对于此有价值现象的分子 PMN膜结合弹力酶相对表达强度。PMN炎性反应强 机制尚有待于阐明，本研究旨在对此问题通过动物实 度=PMN所占比例XPMN膜结合弹力酶相对表达强 验作进一步解析。 度。 1材料与方法 I．3气道粘蛋白(MUC)含量的检测 1．1动物模型的制造 采用常规酶联免疫反应法，MUC单抗RTEIl南美 国Randell教授惠赠。结果由酶标仪于492nm处所测 纯种Wistar大鼠60只，体重(150±50)g．雌雄不 限。实验组大鼠50只，置自制有机玻璃箱行内毒素超 0D值来表不。 声雾化给药，精制内毒素(上海生化所)以牛理盐水配 1．4粘蛋白核酸探针的制备和原位杂交 成3n1S／ml溶液，以5mg／kg的剂量和O．2ml／min的速人气道杯状细胞独特表型MUC5Al∞eDNA质粒由 率给药，每日一次，连续2周。正常组10只大鼠以相 美国Porchet教授惠赠．质粒经常规增量及酶切线型化 应体积的生理盐水同样处理。实验组大鼠第813起随 Mannheim公司地高f体外转录标 后，采用Boehringer