带标签的高迁移率蛋白N2(HMGN2)重组质粒用于亚细胞定位分析.pdf

生物医学工程学杂志 ED-AH,F2. 3--CO33#C’G,-,CL ,-,? FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF 带标签的高迁移率蛋白 # ’ ! $%! 重组质粒用于亚细胞定位分析( ) 熊文碧 冯 云 黄 宁 吴 琦 李 绚 王伯瑶 四川大学 华西基础医学与法医学院 感染免疫研究室 成都 # * +,--.,’ 摘要 为进行 的亚细胞定位分析 提取人 细胞总 设计合成相应引物 应用 从其 3 * * * 9 /012 456 725 78 :;7 总 中扩增 以 和 为载体 成功构建出 真核表达载 3 * ?@,9 9 9 , * 3 725 /012 =25 =25 ABCDE F1G:2 /012 体 转染 细胞 转染效率达 用抗六组氨酸臂的单克隆抗体经免疫细胞化学染色显示经 * /H4I * J-KLM-K * =25?@ 转染的 细胞除细胞核外 胞浆亦明显着色 未转染的 细胞无论细胞核还是细胞浆均 ,9 9 9 3 * * ABCDE/012 /H4I /HNI 显阴性 用兔抗人 多克隆抗体进行的免疫细胞化学染色显示转染的 细胞与用抗六组氨酸臂的单克 O /0123 /H4I 隆抗体检测结果相同 而未转染的 细胞核内和胞浆也均有着色 用两种抗体行 分析在细胞培养上清亦 * /HNI P F4QR5 检测到 激光共聚焦显微镜下观察 转染的 细胞发现绿色荧光主要在核内 但核 3P 9 ,9 3 * /012 F1G:2 /012 /H4I 外也同样存在 本实验结果证明 不仅存在于细胞核中 而且分布于细胞浆 亦可分泌到细胞外 P /0123 * * P 关键词 高迁移率蛋白 3# 3’ 带标签重组表达质粒 细胞转染 细胞 亚细胞定位 2 /012 /H4I ] STTUVWXYVZ[Z\$%! YX^_Z