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带标签的高迁移率蛋白N2(HMGN2)重组质粒用于亚细胞定位分析.pdf
生物医学工程学杂志
ED-AH,F2. 3--CO33#C’G,-,CL ,-,?
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带标签的高迁移率蛋白 # ’
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重组质粒用于亚细胞定位分析(
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熊文碧 冯 云 黄 宁 吴 琦 李 绚 王伯瑶
四川大学 华西基础医学与法医学院 感染免疫研究室 成都
# * +,--.,’
摘要 为进行 的亚细胞定位分析 提取人 细胞总 设计合成相应引物 应用 从其
3 * * * 9
/012 456 725 78 :;7
总 中扩增 以 和 为载体 成功构建出 真核表达载
3 * ?@,9 9 9 , * 3
725 /012 =25 =25 ABCDE F1G:2 /012
体 转染 细胞 转染效率达 用抗六组氨酸臂的单克隆抗体经免疫细胞化学染色显示经
* /H4I * J-KLM-K * =25?@
转染的 细胞除细胞核外 胞浆亦明显着色 未转染的 细胞无论细胞核还是细胞浆均
,9 9 9 3 * *
ABCDE/012 /H4I /HNI
显阴性 用兔抗人 多克隆抗体进行的免疫细胞化学染色显示转染的 细胞与用抗六组氨酸臂的单克
O /0123 /H4I
隆抗体检测结果相同 而未转染的 细胞核内和胞浆也均有着色 用两种抗体行 分析在细胞培养上清亦
* /HNI P F4QR5
检测到 激光共聚焦显微镜下观察 转染的 细胞发现绿色荧光主要在核内 但核
3P 9 ,9 3 *
/012 F1G:2 /012 /H4I
外也同样存在 本实验结果证明 不仅存在于细胞核中 而且分布于细胞浆 亦可分泌到细胞外
P /0123 * * P
关键词 高迁移率蛋白 3# 3’ 带标签重组表达质粒 细胞转染 细胞 亚细胞定位
2 /012 /H4I
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