基因敲除GCV2的酿酒酵母构建.pdf

ofAnhui 责任编辑李占东责任校对况玲玲 安徽农业科学，Journal A加．Sei．2015，43(15)：63—65 基因敲除GC坨的酿酒酵母构建 熊志钦，周世水+ (华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州510006) 摘要[目的]构建低甲醇生成的酿酒酵母工程茵用于酿造低甲醇酒。[方法]利用基因敲除技术，敲除酵母代谢甘氨酸生成甲醇途径 的甘氨酸裂解酶系的基因GCV2。[结果]成功构建出基因敲除GGV2的工程酵母L5，用L5酿造酒中的相对甲醇含量为131mg／L，比初 始菌株的192 ms／L降低31％。[结论]利用基因敲除GCV2的工程酵母茵可有效减少酒中由甘氨酸代谢生成甲醇的量。 关键词基因敲除；甲醇；酿酒酵母 中图分类号S188+．4文献标识码A 文章编号0517—6611(2015)15—063—03 Constructionof cerevisiaewithGeneKnockoutGC坨 Saccharomyces xIoNG SM·shui‘ ofBioscienceand China of z址·qin，ZHOU (School Bioengineering，SouthUniversity dong510006) ordertobrewlowmethanol strainof cerevisiaewasconstructedto low wine，the Saccharomyces Abstract[Objective]In engineering produce methanol of knockoutwasusedtoknockoutCCV2of in wine．[Method]negene glycinecleavageenzymesystemSaccharomyces technology cerevisiae of wassucceedtoconstructthe strainL5ofknockoutGCV2．The metabolic to pathway91)reinemethan01．[Resdt]It engineering methan01is13l inwinebrewedL5．Itdecreased with192 methanolinwinebrewed strain．『Con- mg／L mg／L by 31％compared byoriginal winefrom the cerevisiaeknockout iseffectivetodecreasemethanolin metabolized of GCV2． clusion]It glycine by Saccharomycesgenc wordsGene cerevisiae Key knockout；Methanol；Saccharomyces 甲醇是酒中一种对人体有害的物质，其对人体致死量为 143 mg／kg，特别是在人体内有蓄积作用，不易排出…。因 此，降低酒中甲醇的含量对饮酒人群的健康意义重大。而酒 中甲醇来源主要有2个途径：一是由果胶、纤维素等酿酒原 料分解产生的甲醇，二是酵母菌自身代谢甘氨酸生成的甲 ATCAGCG-I-11GGCCGA7兀℃AT。 醇旧1，即甘氨酸经甘氨酸裂解酶系催化反应生成甲醇，该酶 1．2方法