氯氰菊酯污染土壤的微生物修复及对土著微生物的影响.pdf

第45卷第4期 土壤学 报 VoL45．No．4 2008年7月 ACTAPEDOLOCICASINICA July，2008 氯氰菊酯污染土壤的微生物修复及对土著 微生物的影响木 许育新1’2’ 李晓慧2 滕齐辉2 陈 义1 吴春艳1 李顺鹏2 (1浙江省农业科学院环境资源与土壤肥料研究所，杭州310021) (2南京农业大学生命科学学院微生物学系，农业部农业环境微生物工程重点开放实验室，南京210095) 摘 要 在实验室条件下，在含有氯氰菊酯的土壤中添加氯氰菊酯和3一苯氧基苯甲酸(3．PBA)降解茵 d取样，测定土 CD乃(R_jlo如cDcc珊sp．)和PBMll(P∞甜omo，l伽BP．)，同时设不加菌的对照。分别于0、3、7、15、30 壤中氯氰菊酯和3．PBA的残留，同时用平板计数和变性梯度凝胶电泳(DGGE)方法分析土壤微生物群落的变 化。结果显示：cDT3和PBMll在土壤中协同作用能够更好地降解氯氰菊酯及其中间产物3-PBA。氯氰菊酯对 土著微生物有较强的抑制作用。投加降解菌可以消除农药对土壤微生物的抑制，有助于士著微生物种群的恢 复。但短期内无法改变农药对土壤微生物结构的破坏。 关键词 氯氰菊酯；3．PBA；降解菌；土壤微生物；DGGE 中图分类号Q938 文献标识码 A 氯氰菊酯是拟除虫菊酯类农药的一种，具有对 光、热稳定的特点，在环境中的半衰期较长，很难在自 1材料与方法 然条件下快速降解。在土壤中，经过水解和光解，主 要代谢产物是3一苯氧基苯甲酸(3．PBA)和二氯菊酸1．1供试土壤 (DcVA)¨’2o。3一PBA与拟除虫菊酯不同，它可以在 取未受氯氰菊酯污染的麦田表层土壤(0—30 土壤中迁移，它对环境的危险性较菊酯大，与3一PBAcm)，土壤类型属水稻土类，潴育型水稻土亚类，黄泥 类似具有二苯醚醛键的物质广泛存在于自然界中，如 田土属。土样经风干，过20目筛，备用。其基本性质 霉菌的次生代谢产物、木质素、甲状腺素、二苯呋喃等 为：pH为6．9，有机质含量22．8gkg～。 其他杀虫剂，它们对环境存在着潜在的威胁¨1。对氯 1．2菌液 氰菊酯的微生物降解已有报道H一，但对污染土壤的微 生物原位修复，尤其是两株菌协同降解研究未见 试管中，30℃培养过夜，转接至LB液体培养基中。继 报道。 续培养至对数生长后期，平板法计数，6000rmin“离 000r 降解菌能否在自然环境中发挥降解作用，是降解 心10min，用无菌水洗涤菌体，6 min。1离心 10 菌投入实际应用的关键，也是生物修复技术成功的关 min，以适量无菌水重悬菌体，将菌体浓度调整至 10”cfu 键p。。。外源投加的微生物本身在环境中的行为和 ml～，备用。 对环境的影响如何，也是关系到降解菌使用的一个重 1．3培养基 要问题，目前也越来越受到关注油’91。土壤是农药残 常用牛肉膏蛋白胨细菌培养基；高氏1号放线菌 留最集中和最严重的地方，农药的残留必然会对土壤 培养基；马丁氏真菌培养基；PBA基础盐培养基(分 微生物群落造成破坏。然而土壤也是一个复杂的生 离PBMll用)：lL基础盐培养基中加入PBAO．1g。 态系统，既要充分发挥降解菌的降解作用，同时又要