水解酪蛋白对烟草愈伤组织和悬浮培养细胞生长的促进作用.pdf

第26卷第4期 云南师范大学学报 V01．26No．4 ofYunnanNormal 2006年7月 Journal University Jul．2006 水解酪蛋白对烟草愈伤组织 和悬浮培养细胞生长的促进作用+ 李忠光，龚 明 (云南师范大学生命科学学院，云南昆明650092) 摘要： 报道了水解酪蛋白对烟草愈伤组织和悬浮细胞生长的促进作用，并确定了水解酪蛋白的适宜 用量。 关键词：水解酪蛋白；愈伤组织；悬浮培养细胞；促进作用 中图分类号：Q813文献标识码：A 文章编号： 1007--9793(2006)04一0060—02 烟草作为一种模式植物，在植物抗性研究中 烟草悬浮培养细胞按1：10(v／v)的比例继代到含 被广泛应用，以烟草悬浮培养细胞为研究材料，具 有水解酪蛋白的液体培养基中，愈伤组织和悬浮 有均一性好、条件容易控制、培养周期短、重复性 培养细胞分别于25℃下的培养箱或120转／分的 好等优点[1]。因此，建立稳定而具有高活力的烟 摇床中暗培养。 草悬浮培养细胞体系对植物抗逆性研究有重要作 1．2烟草愈伤组织和悬浮培养细胞生长量的测定 用。 烟草愈伤组织和悬浮培养细胞分别于25℃ 本文在原来建立的烟草愈伤组织和悬浮培养 下的培养箱或120转／分的摇床中暗培养40天或 细胞的基础上[2]，在培养体系中加入水解酪蛋白， 7天后，分别测定二者的生长量，悬浮培养细胞的 探讨水解酪蛋白对烟草愈伤组织和悬浮培养细胞 生长量测定按照李忠光等[2]方法。 生长的影响，试图进一步优化培养条件，以获得生 长迅速、分散性好、材料均一的烟草愈伤组织和悬 2结果与讨论 浮培养细胞体系。 烟草愈伤组织于25℃下的培养箱中暗培养 1材料和方法 40天后，发现随着水解酪蛋白浓度的增加，愈伤 组织的生长速度也随之加快，当水解酪蛋白的浓 1．1烟草愈伤组织和悬浮培养细胞的培养 度达到1g／L时，生长速度达到最大(图1A)。类 烟草愈伤组织来源于幼嫩的烟草茎髓，悬浮 似地，烟草悬浮培养细胞于25℃下120转／分的 培养细胞的建立取继代3次的白色疏松愈伤组织 摇床中暗培养7天后，仍然发现随着水解酪蛋白 与液体培养基按照l：10(w／v)的比例接种而获浓度的增加，烟草悬浮培养细胞的生长速度也随 得，具体参见李忠光等[2]方法。在研究中，固体培 之加快，当水解酪蛋白的浓度达到1g／L时，生长 养基和液体培养基的其它成分不变，分别加入终 速度达到最大，当水解酪蛋白的浓度大于1g／L 浓度为0、0．1、0．5、l、2g／L的水解酪蛋白，取19时，其生长速度增加不明显(图1B)。因此，对烟 愈伤组织接种到固体培养基中进行继代培养，而 草愈伤组织和悬浮培养细胞生长有最大促进作用 *收稿日期：2005—12-31 (2002GH06)资助项目． 作者简介：李忠光(197l一)男(彝族)，云南省永德县人，实验师，主要从事植物逆境生物学研究． 通讯作者：龚明 万方数据 第4期 李忠光，等：水解酪蛋白对烟草愈伤组织和悬浮培养细胞生长的促进作用 ·61· 的水解酪蛋白的适宜用量为1g／L。