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三种启动子-shRNA表达框的制备及其在筛选有效SiRNA中的应用.pdf
浙 江 大 学 学 报 工学版
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第 卷第 期 ?*/@!A*@#
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年 月 )*+,-./*012345.-67-583,95:;’-65-33,5-6=53-3( )+/;$%%
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三种启动子T 表达框的制备及其在
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筛选有效Z[WXY 中的应用
倪 勤 刘克洲 羊正纲 姚航平 陈 智
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浙江大学 医学院附属第一医院传染病研究所 浙江 杭州
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摘 要 为能快速经济地获取小干扰核糖核酸 设计采用特异性延伸引物和上游
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下游两条通用引物 通过重叠延伸一步聚合酶链反应 法一次性快速 简捷地制备包含 或 ?./
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在内的三种人小 多聚酶 启动子 小发夹状 表达框 用该方法制备的增强型绿色荧光蛋白
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特异性三种启动子 表达框在转染 细胞后有效地抑制了 转基因表达 其中以
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?./ 表达框抑制效果最显著 且未检测到干扰素应答基因 的表达 表明该表达框可被
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有效转染并启动产生特异基因的 干扰效应 进而用于快速筛选最佳 位点及其最适搭配启动子
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关键词 小干扰核糖核酸 核糖核酸多聚酶 启动子 筛选 增强型绿色荧光蛋白
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