丝素蛋白来源的一体化纤维环-髓核支架的制备与评估.pdf

天津医药2015年6月第43卷第6期 603 丝素蛋白来源的一体化纤维环-髓核支架的制备与评估 1,2 2△ 2 2 2 2 2 1,2 1,2 1,2 杜立龙 ，徐宝山 ，杨强 ，马信龙 ，李秀兰 ，张杨 ，郭悦 ，丁晓明 ，祁霁舟 ，赵家宁 摘要：目的 评估以丝素蛋白为材料构建的一体化纤维环-髓核双相支架作为组织工程椎间盘支架的可行性。 方法 以丝素蛋白溶液为原料，分别采用石蜡球致孔法和相分离法制备三维多孔一体化纤维环-髓核支架。采用体 视显微镜、扫描电镜观察支架内部结构，测定双相支架纤维环相和髓核相的孔径、孔隙率及一体化压缩弹性模量；分 离培养兔纤维环细胞和髓核细胞，接种至双相支架的相应部位，体外培养48h，扫描电镜、死活（Live/dead）细胞染色 评价支架与细胞的生物相容性；CCK-8检测细胞的增殖活性。结果 体视显微镜和扫描电镜可见双相支架纤维环 相和髓核相均呈相互连通的多孔结构，孔隙高度连通，纤维环髓核交接区域结合紧密；纤维环相孔径为（220.0±23.1） μm，髓核相孔径为（90.0±17.8）μm；孔隙率分别为91%和93%；一体化支架压缩弹性模量为（150.7±6.8）kPa。扫描电 镜可见均匀地黏附在支架表面，细胞周围有细胞外基质分泌；Live/dead染色显示细胞在支架上活性良好，无死细胞； CCK-8增殖分析显示纤维环细胞和髓核细胞均具有良好的增殖活性。结论 以天然丝素蛋白构建一体化纤维环- 髓核双相支架，具有良好的孔径、孔隙率和细胞相容性，一体化支架两部分结合紧密，并且具有优越的力学性能，是 构建组织工程椎间盘的理想支架载体。 关键词：组织工程；丝素蛋白；椎间盘；支架；纤维环；髓核 中图分类号：R318.17，R329-33 文献标志码：A DOI: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.06.007 Manufactureandevaluationofintegratedbiphasicsilkfibroinscaffoldmadebyannulus fibrosus-nucleuspulposustissueengineering 1,2 2△ 2 2 2 2 DULilong ，XUBaoshan ，YANGQiang ，MAXinlong ，LIXiulan，ZHANGYang ，GUOYue ， DINGXiaoming1,2 1,2 1,2 ，QIJizhou ，ZHAOJianing 1TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China；2TianjinHospital △CorrspondingAuthor E-mail：xubaoshan99@126.com Abstract：Objective Toassesstheprospectofintegratedbiphasicsilkfibroinscaffoldmadebyannulusfibrosus-nu⁃ cleuspulposustissueengineeringinapplicationasintegratedintervertebraldisc （IVD）.Methods Anintegratedannulusfi brosus-nucleuspulposus （AF-NP）biph